水椰八角铁甲Octodontanipae(Maulik)是危害我国南方棕榈科植物的重要入侵害虫。本研究基于前期的转录组数据进行了水椰八角铁甲多态性SSR位点的筛选和父权鉴定技术的开发,并结合交配行为观察、内部生殖结构、后代遗传分化研究,对其精子竞争模式进行了探讨。(1)通过对水椰八角铁甲unigene序列进行微卫星搜索,共获得了 1274个SSR位点信息,其重复单元以1-3碱基为主,各占总SSR数的43.56%、26.14%和28.18%。其中A/T和AT/TA是其主要的重复类型。使用软件批量设计SSR引物,其中有104对引物可在水椰八角铁甲中扩增出特异性的条带,51对引物能跨物种扩增(能在椰心叶甲中扩增出特异性的条带),表明所获得的水椰八角铁甲的SSR引物具有一定的种间转移性。(2)检验了 80对引物的产物多态性,获得了 9个多态性位点,其PIC值(多态性信息含量)在0.062-0.582之间(平均值为0.38,为中等多态性)。9个多态性SSR位点中,位点On 2可用于物种快速鉴定,位点On 9可用于该虫的性别鉴定。结合其中5个位点即可完成水椰八角铁甲的父权鉴定。(3)根据P2值研究结果显示,水椰八角铁甲的精子竞争模式为最后雄性精子优先,且最后交配的雄虫后代比例为94.6±1.4%。两次交配下雌虫产下的后代基因分化明显,产生了许多新的基因型,表明多次交配能增加后代遗传多样性。(4)水椰八角铁甲雌性的受精囊高度骨化,连接受精囊和生殖腔的导管细长而狭小,可能会导致两只雄虫的精子出现精子分层现象,精子取代反应只发生在生殖腔内,水椰八角铁甲雌性特殊的内部生殖构造是造成最后雄性精子优先的重要因素。此外,该虫存在精子二型现象。(5)在P2值实验中,雌虫与第一只雄虫交配时长为61.8±11.9 min,雌虫与第二只雄虫交配时长为124.7±19.3 min,前者显著短于后者,表明最后交配的雄虫会通过延长交配时长来获得精子竞争优势。本研究开发得到的多态性SSR位点信息将为水椰八角铁甲及其近缘物种的亲缘鉴定、遗传分化、入侵及扩张机制等研究提供一定的参考。此外,本研究从内部生殖结构、交配行为等方面解释了水椰八角铁甲的精子竞争模式,将有助于全面了解该虫的交配习性和繁殖策略,为进一步深入分析水椰八角铁甲成功入侵、扩散、繁殖和猖獗危害机理,采用性干扰技术等有效控制水椰八角铁甲种群等提供科学依据。