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目的:观察壮药龙钻通痹方对类风湿关节炎模型大鼠血清白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、滑膜RANK、RANKL、NF-κB以及Th17/Treg细胞免疫平衡的影响,探讨壮药龙钻通痹方对类风湿关节炎RANK/RANKL/NF-κB信号通路相关因子以及细胞免疫调节的作用机制。方法:72只SD大鼠,雄性,体重(120±30)g,随机选取12只为正常对照组(空白组),其余60只采用6号注射针从受试大鼠右后肢趾部15°方向插入,皮内注射0.1ml完全弗氏佐剂致炎,于7天后按上述方法和剂量再次致炎,制备类风湿关节炎(RA)模型。造模成功后将大鼠随机分为5组:模型组12只;甲氨蝶呤组12只;壮药龙钻通痹方高、中、低剂量组各12只。空白组,生理盐水2mL/100g灌胃,每日1次;模型组,生理盐水2mL/100g灌胃,每日1次;甲氨蝶呤组灌服甲氨蝶呤药液2.7mg/kg,每周灌服1次;壮药龙钻通痹方高、中、低剂量组,分别以壮药龙钻通痹方(含生药6,3,1.5)g/d灌胃,每日分2次灌服。共计给药21天。第21天,腹主动脉采血,膝关节取滑膜。采用酶联免疫分析法检测各组大鼠IL-1β、TNF-α的水平;采用RT-PCR、免疫组化法技术检测RA大鼠滑膜RANK、RANKL、NF-κB的水平;采用流式细胞学实验检测各组大鼠Th17/Treg的水平。数据分析采用SPSS 19.0统计学软件进行数据处理。结果:1.血清IL-1β、TNF-α表达水平:与模型组相比、各治疗组血清IL-1β、TNF-α的水平均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);高剂量组与甲氨蝶呤组相比,血清IL-1β、TNF-α的水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);壮药龙钻通痹方高、中剂量组与低剂量组相比,血清IL-1β、TNF-α的水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。2.滑膜RANK、RANKL、NF-κB基因表达水平:与模型组相比,各治疗组滑膜RANK、RANKL、NF-κB基因的表达均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);壮药龙钻通痹方高、中剂量组与低剂量组相比,RANK、RANKL、NF-κB基因水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。3.滑膜RANK、RANKL、NF-κB蛋白表达水平:与模型组相比,各治疗组滑膜RANK、RANKL、NF-κB蛋白的表达均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);壮药龙钻通痹方高剂量组、中剂量组与壮药龙钻通痹方低剂量组相比,RANK、RANKL、NF-κB蛋白水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。4.血清Th17、Treg表达水平:与空白组相比,模型组血清Th17水平明显升高,Treg水平明显降低,差异有显著统计学意义(P<0.01);与模型组比较,各治疗组血清Th17水平明显降低,Treg水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),壮药龙钻通痹方高、中剂量组与低剂量组相比,血清Th17水平显著降低,Treg水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.壮药龙钻通痹方可以降低类风湿关节炎大鼠IL-1β、TNF-α的水平,同时能减轻大鼠关节肿胀度;2.壮药龙钻通痹方可以降低类风湿关节炎大鼠滑膜RANK、RANKL、NF-κB水平,改善关节炎症症状;3.壮药龙钻通痹方可以降低Th17表达的同时升高Treg的表达水平,促进细胞免疫平衡。