基于分子印迹技术的检测莱克多巴胺的电化学传感方法的建立

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莱克多巴胺(Ractopamine, RCT)是一种β2-肾上腺素受体激动剂,作为宫缩抑制剂、支气管扩张剂应用于临床。同时RCT具有提高瘦肉率和促生长的作用,因而常被非法用于动物饲料中,以提高经济效益。鉴于动物性食品中RCT残留的危害,欧共体和我国明确禁止在动物饲料中添加RCT。建立高效快速的检测方法是监督检测RCT滥用的关键所在。目前,用于检测RCT的方法主要有色谱分析法和免疫分析法。这些方法准确性好、灵敏度高,但操作复杂、试验时间长、成本高,不适用于现场快速高效检测。当前动物性食品安全监测需要检测RCT的样品数量巨大。因此,建立一种准确、快速、简便、经济的RCT检测方法势在必行。本实验以分子印迹技术和电化学传感技术为理论依据,选择新型的电极材料,构建传感器的敏感元件,建立了两种检测饲料和动物性食品中RCT的电化学传感方法,并对其检测性能进行评价。具体的研究内容和结果概述如下:1.莱克多巴胺分子印迹聚合物(Molecularly imprinted polymers,MIPs)的制备和性能研究。利用计算机模拟技术(Computer simulationtechnique, CST)选出甲基丙烯酸作为合成莱克多巴胺分子印迹聚合物的最适宜功能单体;采用封管聚合法制备出对莱克多巴胺具有特异性吸附作用的分子印迹聚合物。通过红外光谱分析了模板分子与功能单体之间的相互作用和识别机理;通过紫外吸附实验对莱克多巴胺分子印迹聚合物的吸附性能进行了综合评价,该印迹物对莱克多巴胺具有显著的吸附作用,平均吸附率达83.4%。将印迹物的制备方法应用于莱克多巴胺分子印迹膜(Molecularly imprinted membrane, MIM)的制备当中,所合成的印迹膜同样能特异性识别并吸附莱克多巴胺分子,可作为敏感元件,应用于检测莱克多巴胺的新型电化学传感方法的建立。2.基于分子印迹技术的检测莱克多巴胺的电导型传感方法的建立:在修饰有四氰基对醌二甲烷(7,7,8,8-Tetracyanoquinodimethane,TCNQ)的丝印电极(Screen printed electrode, SPE)表面,利用热聚合法原位合成含有莱克多巴胺分子印迹结合位点的分子印迹膜,设计并制作测试电极,通过USB接口将电极与电导仪相连接,建立检测莱克多巴胺的分子印迹电导型传感方法,通过更换带有TCNQ-MIM的丝印电极条即可实现多个样品的快速检测或连续性测试。该传感方法的检测限达0.05mg/L,在0.2~1.0mg/L范围内具有良好的线性关系,样品检测回收率介于97.0%~99.3%之间,敏感元件寿命在4个月以上。方法简单,回收率高,稳定性较好,能够应用于莱克多巴胺的现场快速检测。3.基于分子印迹技术的检测莱克多巴胺的电流型传感方法的建立:在多壁碳纳米管(Multi-wall Carbon Nanotubes, MWCNs)修饰的丝印电极上用热聚合法原位合成莱克多巴胺分子印迹膜。将一次性MWCNs-MIM修饰的电极与便携式微电流仪相连接,建立检测莱克多巴胺的分子印迹电流型传感方法,通过更换电极即可实现多个样品的快速检测或连续性测试。该传感检测体系检测莱克多巴胺的检测下限是0.012mg/L,在0.04~0.24mg/L范围内具有良好的线性关系,回收率为91.7%~97.8%,检测时间在5min之内,敏感元件寿命在6个月以上,且具有较高的灵敏度和特异性,易于操作,成本低廉,是一种能适用于现场快速检测动物性产品中莱克多巴胺的新型电化学传感技术。
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