【摘 要】
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捕食螨是控制小型吸汁性害虫害螨的重要天敌之一,国内外优良生物防治产品。为提高其现有人工饲料的营养有效性,本文旨在从添加益生菌角度,改善现有人工饲料,以期开发经济高效的捕食螨人工饲料。首先索了,取食不同食物对不同食性捕食螨体内细菌群落的影响,根据食物和食性对捕食螨体内菌群间的差异,探明食物及食性与捕食螨共生菌互作关系,筛选可能对改进现有人工饲料的有益菌。其次尝试通过饲喂抗生素和高温处理去除加州新小绥
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捕食螨是控制小型吸汁性害虫害螨的重要天敌之一,国内外优良生物防治产品。为提高其现有人工饲料的营养有效性,本文旨在从添加益生菌角度,改善现有人工饲料,以期开发经济高效的捕食螨人工饲料。首先索了,取食不同食物对不同食性捕食螨体内细菌群落的影响,根据食物和食性对捕食螨体内菌群间的差异,探明食物及食性与捕食螨共生菌互作关系,筛选可能对改进现有人工饲料的有益菌。其次尝试通过饲喂抗生素和高温处理去除加州新小绥螨内共生菌。最后,通过体外培养加州新小绥螨卵内共生菌,经分离鉴定菌株后添加至人工饲料中,研究添加共生菌的人工饲料对加州新小绥螨雌性和雄性生长发育及生殖能力的影响。具体内容如下:1.食物对不同食性捕食螨细菌群落的影响植食性节肢动物的微生物群受寄主植物和取食习性影响,但此类研究在天敌中较少。本研究通过16S r RNA高通量测序分析以人工饲料、花粉和天然猎物二斑叶螨Tetranychus urticae为食的两种不同食性捕食螨——加州新小绥螨Neoseiuluscalifornicus和巴氏新小绥螨Neoseius barkeri的整个体内细菌群落。结果显示,取食人工饲料的加州新小绥螨和巴氏新小绥螨体内细菌群落,与取食花粉和二斑叶螨组体内细菌群落Beta多样性均存在显著差异(加州新小绥螨:R=0.256,P=0.011;巴氏新小绥螨:R=0.236,P=0.018);均以人工饲料为食的两种捕食螨体内细菌群落Alpha多样性存在显著差异(Shannon指数t(11)=5.394,P<0.001,Df=11;Simpson指数:t(11)=-6.8853,P<0.0001,Df=11)。相对丰度表明,两种捕食螨微生物群落均以α-变形菌纲和γ-变形菌纲为优势菌群。此外,通过取食不同食物捕食螨内共生菌的差异,筛选出三个差异科,芽孢杆菌科、慢生根瘤菌科和红杆菌科。2.添加共生菌的加州新小绥螨内共生菌的去除为去除加州新小绥螨内共生菌,本研究通过组合三种抗生素(盐酸四环素,氨苄青霉素,利福平)饲喂和高温(38℃,4h)处理加州新小绥螨。处理后采用PCR检测加州新小绥螨载菌量,并利用荧光原位杂交技术观察其体内共生菌分布情况。结果显示抗生素和高温处理均能部分去除加州新小绥螨载菌量;此外,取消处理3d后加州新小绥螨载菌量迅速回升至正常水平。细菌密集遍布正常加州新小绥螨体内,抗生素和高温处理后加州新小绥螨从食道到肠道中载菌量与正常螨相当,腹部外围菌量降低。3.人工饲料对加州新小绥螨生长发育及生殖能力的影响通过离体培养加州新小绥螨卵内共生菌,分离筛选后获得12株菌株。选取菌株节杆菌属Arthrobacter sp.和争论贪噬菌Variovorax paradoxus菌株分别添加至人工饲料中,探究添加共生菌的饲料对加州新小绥螨雌性和雄性生长发育及生殖能力的影响。结果表明两种添加共生菌的饲料对加州新小绥螨雌性和雄性生长发育时间均无显著影响。节杆菌饲料对加州新小绥螨雌性和雄性生殖能力均无显著影响。争论贪噬菌饲料对雌性生殖能力无显著影响但取食争论贪噬菌饲料雄性与取食二斑叶螨雌性(避免饲料对雌性的影响)交配后,雌螨未产卵。
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