温氏附红细胞体生物学特性的研究及双抗体夹心ELISA、PCR诊断方法的建立

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cxz2004
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本文对温氏附红细胞体生物学特性的研究及双抗体夹心ELISA、PCR诊断方法的建立进行了研究。文章建立了从血液中检测奶牛温氏附红细胞体抗原的双抗体夹心ELISA。试验最佳条件为,抗体最适包被量为156μg/mL,酶标抗体最适工作浓度为1:400稀释,抗原及酶标抗体的作用时间分别为37℃1 h,封闭液为5%犊牛血清,底物显色时间为15 min.对温氏附红细胞体抗原的最低检出量为6.64μg/mL.全血及带有附红细胞体的红细胞与纯化抗体反应的最大稀释倍数分别为1:160和1:40,可按照此浓度检测血液中的附红细胞体抗原。对该方法进行特异性阻断试验、交叉性试验和重复性试验,结果表明它是一种特异、灵敏、快速的诊断方法,并适合作群体检测。
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