【背景】胰腺癌（Pancreatic Cancer,PC）是预后最差的恶性肿瘤之一。传统的治疗方法对胰腺癌的诊疗没有起到预期的作用,目前迫切需要去开发新的治疗方向和治疗靶点。微小RNA（mi RNA）由于与肿瘤的发生发展息息相关而引起越来越多的关注。在肿瘤中异常表达的mi RNA中,至少有50%可以作为转录后调节因子并发挥重要作用。微小RNA主要通过直接结合其靶基因的信使RNA展现致癌或肿瘤抑制活性。Bmi-1基因是转录抑制因子多梳基因家族（polycomb group genes,Pc G）的成员,目前已经被证实参与多种肿瘤的发生发展。【目的】本实验目的在于探究mi R-141在胰腺癌中通过下调Bmi-1的表达发挥抑癌作用的机制。【方法】1.使用GEO数据库中下载的胰腺癌mi RNA表达谱芯片进行数据分析,探究mi R-141在胰腺癌组织及相应的正常组织中的表达水平。2.采用GEO数据库中下载的胰腺癌m RNA表达谱芯片分析Bmi-1在癌组织和正常样本中的表达量;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Bmi-1在胰腺癌细胞和正常细胞的表达量。通过表达谱芯片分析mi R-141与Bmi-1表达水平之间是否存在联系性。3.CCK-8法检测过表达mi R-141后胰腺癌细胞的增殖能力;平板克隆形成实验检测mi R-141的上调表达对细胞克隆形成能力的影响。通过Transwell迁移实验检测mi R-141的表达上调后细胞的迁移能力是否产生变化。4.CCK-8法检测敲减Bmi-1后胰腺癌细胞的增殖能力;平板克隆形成实验检测Bmi-1的下调表达对细胞克隆形成能力的影响。通过Transwell迁移实验检测Bmi-1的表达降低后细胞的迁移能力是否产生变化。5.通过生物信息学数据库检索mi R-141与Bmi-1之间可能存在的结合位点;荧光素酶报告基因实验论证mi R-141与Bmi-1之间是否存在靶向结合位点。上调mi R-141在胰腺癌细胞中的表达蛋白水平检测Bmi-1的变化。6.上调靶基因Bmi-1的表达,与mi R-141 mimic共转染,观察胰腺癌细胞增殖迁移能力的变化。【结果】1.根据对两组胰腺癌相关mi RNA表达谱芯片的分析结果显示,mi R-141在胰腺癌中表达下调;实时荧光定量PCR检测mi R-141在胰腺癌细胞和正常胰腺细胞中表达水平。2.Bmi-1在胰腺癌组织和细胞中呈现高表达。Pearson’s相关性分析显示,mi R-141与Bmi-1在胰腺癌中的表达呈负相关。3.上调mi R-141的表达后,胰腺癌细胞的增殖,克隆形成能力以及迁移能力减弱。4.干扰胰腺癌细胞中Bmi-1的表达后,与过表达mi R-141的结果类似,胰腺癌细胞的增殖和迁移能力受到抑制。5.双荧光素酶报告基因实验证明了mi R-141与Bmi-1存在靶向结合位点。蛋白免疫印迹法（Western blot）实验结果显示高表达mi R-141抑制Bmi-1的蛋白表达水平,进一步证明了mi R-141与Bmi-1之间的靶向结合关系。6.Bmi-1的过表达可以逆转mi R-141对胰腺癌增殖迁移的抑制作用。【结论】mi R-141在胰腺癌中呈现低表达并在胰腺癌中起到抑癌作用。Bmi-1在胰腺癌中的表达呈现异常增高的趋势,mi R-141与Bmi-1之间存在负相关性。通过研究,我们发现mi R-141可以通过靶向作用于Bmi-1来抑制胰腺癌细胞的生长过程。这表明mi R-141/Bmi-1可能成为胰腺癌基因治疗方向研究的新靶点,为胰腺癌的诊疗开辟新的道路。