目的论文选取阿尔兹海默病(AD)核心生物标志物淀粉样蛋白寡聚体(AβOs)为目标物,以AβOs电化学适体传感器面临的适体构型简单、传感策略陈旧、特异性和灵敏度不理想等问题为切入点,从适体特殊结构设计和调控/放大电学检测信号等方面着手,建立系列灵敏度和特异性较高、简单快速检测AβOs的新方法,为生物样本中痕量物质识别及定量检测提供高效、准确的方法学基础,为低浓度不同聚集形态的Aβ检测提供新思路。方法本论文以免标记适体作为AβOs的生物受体,合理设计两种DNA序列:含有两个对称短臂的AβOs适体(Apt)和与对称短臂互补的信号传导探针(STP)。首先通过Au-S和Pd-S键将Apt固定在金电极和钯修饰电极上,然后分别与金纳米颗粒(AuNPs)、铜胶-联吡啶钌共掺杂AuNPs的核-壳型光学复合纳米颗粒(RuCu@AuNPs)及掺杂AuNPs的铜金属有机框架(AuNPs@CuMOF)这三种不同金属纳米材料标记的STP杂交,在电极表面形成三链DNA结构,产生强烈的电化学和电致化学发光(ECL)信号(switch“on”)。最后与AβOs培育,Apt特异性结合AβOs,STP被置换出来而远离电极表面,信号明显减弱(switch“off”)。通过三螺旋分子开关(THMS)调控信号,测量AβOs加入前后的信号差值,建立三种不同特异性检测AβOs的电学适体传感器。通过扫描、透射电子、原子力和荧光倒置显微镜等对修饰电极和金属纳米材料进行微观形貌表征,使用紫外、红外光谱、能量色散X射线光谱和X射线衍射对金属纳米材料进行性能研究,使用循环伏安法(CV)、电化学阻抗法(EIS)、差分脉冲伏安法(DPV)、ECL实现对AβOs的灵敏检测,经方法学评价和可行性验证对三种传感器的分析性能进行系统研究。结果在最优条件下,三种AβOs电化学适体传感器的线性范围分别为1~1000fmol/L、1~1000 fmol/L和0.5~500 fmol/L,检出限(LOD)为0.5 fmol/L、0.5 fmol/L和0.25 fmol/L。与双螺旋策略相比,灵敏度放大了约3倍。经系统方法学评价和可行性验证证实三种传感体系有较好的稳定性、重复性、特异性和选择性,并分别应用于加标血清样品和人工脑脊液的检测,回收率均在95.8%~102.3%之间,RSD<4.04%,且与ELISA测定结果有良好的一致性。结论本论文以AD的核心生物标志物-AβOs为目标物,利用三种不同的金属纳米颗粒标记STP实现多样的电化学信号检测,协同THMS策略调控信号变化,将三链DNA分子结构、免标记适体和靶标触发链置换模型的优势有机融合,建立系列检测AβOs的新型电化学适体传感器。传感器具有优异的分析性能,可区分不同聚集形态的Aβ以实现特异性检测,为监测AD病程的发生和发展提供了一种新思路,具有较好的应用前景。