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研究目的:乳腺增生症多见于育龄年龄段的妇女,是所有乳腺病中最常见的,在全部乳腺疾病中所占比例达75%以上,目前国内外尚无矿物药外敷治疗乳腺增生的相关研究,临床上尚缺乏有效的治疗手段,传统内分泌治疗（如他莫昔芬、托瑞米芬等）或内服剂方（如柴玄消癖汤、当归芍药散加味等）治疗虽然短期内可缓解乳房疼痛等症状,但疗效并不确切,而且长期服用易产生内分泌紊乱或肝肾毒性等严重副作用。我们在临床应用上矿物药乳腺宁贴片治疗乳腺增生缓解疼痛的主观效果明显,仍缺乏客观实验依据,同时乳腺增生的具体分子机制及乳腺宁贴片对乳腺增生的作用机制尚不清楚,本项目旨在证明外敷壮药乳腺宁贴片对治疗乳腺增生的作用疗效,检测乳腺宁贴片的成分进而探究其作用机制,为进一步的临床应用提供实验依据。研究方法:1.应用随机数字表法将30只SD大鼠分为三组,分别表示为对照组、乳腺增生组和乳腺宁贴片组,每组分为10只。乳腺增生组和乳腺宁贴片组的大鼠通过肌肉注射苯甲酸雌二醇序贯黄体酮,从而构建乳腺增生模型。从肌注开始,乳腺宁贴片组在大鼠第2对和第3对乳头外敷乳腺宁贴片膏药3g,而对照组和乳腺增生组给予等量赋型剂,每24h换药1次,在每次外敷后都用缚带将大鼠的躯干部位缠绕,大鼠单笼喂养。用电子游标卡尺测量三组SD大鼠第2、3对乳头的直径和高度,观察三组SD大鼠乳腺组织的病理学表现,运用免疫组化法检测各组大鼠的免疫组化指标的表达情况,包括雌激素受体α（ERα）、孕激素受体（PR）和Ki-67。2.应用随机数字表法将24只SD大鼠分为四个组,分别表示为对照组、小剂量组、中剂量组和大剂量组,每组分为6只。乳腺宁贴片大、中、小剂量组每日灌胃相应剂量的乳腺宁贴片（给药的剂量参照成人临床等效剂量的2倍、1倍、0.5倍,按照体表面积法换算而得）,予以相同体积的蒸馏水灌胃于对照组的大鼠,每日一次,连续2周。于末次给药1h,从大鼠的颌下取血后用全自动血液分析仪检测血浆中白细胞（WBC）、血小板（PLT）、血红蛋白（HGB）、红细胞（RBC）计数。血样以3000r/min离心10min,分离血浆及血清,以全自动生化分析仪测定大鼠血浆中的肝功能指标包括谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、白蛋白（ALB）、甘油三酯（TG）、总蛋白（TP）、总胆红素（TBIL）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆固醇（CHOL）,肾功能指标包括尿素氮（BUN）、血肌酐（CREA）、尿素（UA）,分析乳腺宁贴片是否有毒副作用。另外,将乳腺宁贴片送至浙江大学进行X射线衍射分析其原组成成分。结果:1.对照组乳头直径为1.40±0.07mm,高度为1.24±0.09,乳腺增生组乳头直径为1.64±0.05mm,高度为2.24±0.12mm,乳腺宁贴片组乳头直径为1.51±0.03mm,高度为1.87±0.10mm,乳腺增生组与对照组相比,其乳头直径呈增加趋势（P<0.05）,乳头高度呈显著增加趋势（P<0.01）;乳腺宁贴片与乳腺增生组相比,其大鼠的乳头直径呈降低趋势（P<0.05）,乳头高度呈降低趋势（P<0.05）,说明建模成功、乳腺宁贴片对乳腺增生治疗有效。光镜下,乳腺增生组与对照组相比,其乳腺小叶的腺泡在数量上呈显著增多趋势,乳腺腺腔扩张同时出现大量分泌物,乳腺的导管上皮细胞呈明显增生现象,在排列上呈现紊乱的现象;乳腺宁贴片组与乳腺增生组相比,其乳腺小叶的腺泡数在数量上呈显著减少,管腔内的分泌现象减弱,说明乳腺宁贴片能改善乳腺病理。与对照组比较,乳腺增生组ERα、PR和Ki-67表达均显著增加（P<0.01）;与乳腺增生组比较,乳腺宁贴片组ERα、PR和Ki-67表达均降低（P<0.05）,说明给药后可抑制ERα、PR、Ki-67的活性。2.从血常规指标看,乳腺宁贴片大、中、小剂量组的大鼠WBC、PLT、HGB、RBC与对照组相比,差异均无统计学意义（P>0.05）;从肝功能指标看,乳腺宁贴片大、中、小剂量组ALT、AST、ALP、TP、ALB、TBIL、CHOL与对照组相比,差异均无统计学意义（P>0.05）;从肾功能指标看,乳腺宁贴片大、中、小剂量组BUN、CREA、UA与对照组比较,差异均无统计学意义（P>0.05）,说明乳腺宁贴片对大鼠没有血象损害和肝肾功能损害。乳腺宁贴片经检测分析其成分为氧离子含量为49.94%、硫离子含量为17.88%、钠离子含量为31.10%、氯离子含量为00.51%、硅离子含量为00.27%、铝离子含量为00.31%。结论:1.从物理层面看,乳腺宁贴片能够改善乳腺增生大鼠的乳头直径和高度变化情况;从细胞层面看,乳腺宁贴片能够改善乳腺增生大鼠乳腺的小叶腺泡数、乳腺导管及管腔分泌情况;从分子水平看,乳腺宁贴片能够降低乳腺增生大鼠的雌激素受体α、孕激素受体和Ki-67受体的表达。2.从毒副作用看,乳腺宁贴片对大鼠没有肝肾功能损害和血象功能损害。经检测分析乳腺宁贴片为硫酸盐矿石粉末加适量赋型剂制得硬膏,硫酸盐矿石粉末是一种多硫酸盐类,由硫酸根离子与多种金属元素阳离子相结合而成,主要成分包括Na2SO4、Si O2、Al2（SO4）3。