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目的研究证明LncRNA RP11-79H23.3(RP11-79H)可能作为miR-107的竞争性内源性RNA(ceRNA)调控靶基因PTEN的表达及对膀胱癌迁移侵袭的影响。进一步阐述LncRNA RP11-79H23.3在膀胱癌中的作用以及相关信号通路网络调控的分子机制,并为其诊断、治疗和预后等寻找新的靶分子和药物提供理论依据。方法通过使用微阵列分析筛选出差异表达的lncRNA和mRNA。我们把新发现的lnc RNA RP11-79H23.3作为研究对象,绘制出相应的ceRNA网络。通过RT-qPCR实验检测RP11-79H23.3和PTEN与正常组织、细胞相比,在膀胱癌组织、细胞中的表达水平。功能上,当在体内上调或下调RP11-79H23.3后采用CCK8法检测细胞增殖,平板划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,同时观察重新排列的细胞骨架及各组细胞形态变化,Tunel一步法和Hochest 33342检测细胞凋亡,流式细胞术分析细胞周期进程,Western Blot检测相关凋亡蛋白(Caspase 3,Bax,Bcl-2)的表达情况以及miR-107和RP11-79H23.3调节PTEN及PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达水平;在体外建立裸鼠成瘤模型,免疫荧光和免疫组化法检测体内肿瘤发生,血管生成和肺转移情况。机制上,我们用生物信息学预测了miR-107与RP11-79H23.3及PTEN的结合位点,并通过双荧光素酶报告基因实验证实mi R-107与RP11-79H23.3及PTEN的结合,且RP11-79H23.3通过吸附miR-107作为ce RNA发挥作用,接着我们用FISH在膀胱癌细胞中验证了RP11-79H23.3与miR-107的亚定位和表达情况,进一步用RIP实验证明RP11-79H23.3与miR-107的相互结合关系,最后用RT-qPCR方法检测mi R-107与RP11-79H23.3及PTEN三者之间的调控关系。结果我们分析了BC的lncRNA和mRNA表达谱及通过RT-qPCR检测发现了新的lncRNA RP11-79H23.3在BC组织和细胞中显著下调,并且与PTEN的表达相对应,同时,在BC中RP11-79H23.3的表达水平和临床分期呈负相关。在功能上,CCK8、Edu及细胞平板克隆实验表明RP11-79H23.3的过表达可抑制细胞增殖,平板划痕和Transwell实验证明RP11-79H23.3的过表达会抑制细胞的迁移及侵袭,细胞骨架实验证实RP11-79H23.3过表达可抑制微丝重排,并且RP11-79H23.3的过表达会阻滞细胞周期进程和诱导体外细胞凋亡。此外,上调RP11-79H23.3能抑制体内的肿瘤发生,血管生成和肺转移,而敲低RP11-79H23.3发挥相反的作用。从机制上看,利用生物信息学预测到miR-107与RP11-79H23.3及PTEN的结合位点,我们运用双荧光素酶报告基因实验证实miR-107与RP11-79H23.3及PTEN可相互结合,RP11-79H23.3可以直接与mi R-107结合并消除对调节PI3K/AKT信号通路的靶基因PTEN的抑制作用。通过FISH实验证明了RP11-79H23.3与miR-107共定位于细胞质中。然后结合RIP实验结果检测到RP11-79H23.3与miR-107能互相结合。更重要的是,通过Edu、Transwell实验证明在EJ细胞中过表达miR-107后可以减少上调RP11-79H23.3引起抑制细胞增殖侵袭的作用,而在T24细胞中降低miR-107的表达可抵消下调RP11-79H23.3所介导的抑制细胞增殖侵袭的作用。此外,采用RT-qPCR实验检测到上调mi R-107后会降低PTEN的表达水平并且RP11-79H23.3和PTEN表达相对应。随后WB实验证实RP11-79H23.3可能作为mi R-107的竞争性内源性RNA(ceRNA)来调节肿瘤抑制因子PTEN,并可通过PI3K/AKT信号传导途径揭示膀胱癌发生发展的新的分子机制。结论1.在体内外上调RP11-79H23.3的表达会抑制膀胱癌的增殖、侵袭迁移、血管形成以及肺转移,并会诱导细胞凋亡。2.在膀胱癌中RP11-79H23.3显著下调,与PTEN的表达水平呈正相关。3.RP11-79H23.3作为miR-107的竞争性内源性RNA(ceRNA)来调节PTEN及PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达水平。