重组牛碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在深Ⅱ°烧伤创面中的临床应用及作用机制的研究

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目的:烧伤是常见的损伤,即可发生皮肤的局部损伤,也可引起全身各系统和器官的一系列病变,严重危害人类健康,生命安全和生活质量。烧伤创面愈合是实际上是机体通过自身修复及再生能力,来达到恢复其表面连续性和皮肤完整性以及维持机体内环境稳定所进行的,一系列的修复与再造活动。在这个复杂的生物学过程中,有多种组织和修复细胞、细胞外基质及各种调控因素参与。剑面愈合方式与烧伤的深度密切相关,也决定着治疗原则和评估预后。深Ⅱ°创面的愈合依靠残存的皮肤附件的上皮再生将创面覆盖愈合,上皮愈合的细胞主要来自毛囊等皮肤附件。对于保守治疗深Ⅱ°创面而言,合理的创面用药常常决定不同的愈合结果。   碱性成纤维生长因子(bFGF)是一种碱性多肽,能促进多种来自中胚层和神经外胚层的细胞生长、增殖和分化,在垂体、下丘脑、视网膜、肾上腺、胸腺、黄体、肾、心、肝、胎盘及多种肿瘤组织中均有分布。人、鼠、牛的bFGF cDNA序列均为单拷贝基因,并且核苷酸序列高度同源。组织受到损伤后,局部bFGF分泌不断增加,创面局部的单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、成纤维细胞等不仅可通过趋化作用向损伤部位聚集,bFGF能促进肉芽组织和血管的不断生成,同样也能促进与损伤修复重建有关的软组织和骨组织中各种细胞分裂增殖。   作为一种促进创面愈合的新型生物制剂,bFGF已经在烧伤临床中有所应用,但是其对深Ⅱ°烧伤创面愈合具体作用机制、合理给时药间不是十分明确。针对深Ⅱ°烧伤创面的临床特点以及愈合规律,本研究设计了不同时期的给药方法,并应用自身作对照,观察重组牛碱性成纤维生长因子(bFGF)对深Ⅱ°烧伤创面愈合、愈合时间和病理学改变的影响,探讨bFGF的可能作用机制及其在深Ⅱ°烧伤创面外用的最佳时机,为临床合理用药提供实验依据。   方法:   1.临床资料:病例为我科2008年3月-2010年1月期间收治的深Ⅱ。烧伤患者共50例,男性35例,女性15例,平均年龄31.5岁;平均烧伤面积10%±2%;颌面部10例,颈部5例,上肢部位23例,躯干部位7例,下肢5例。   2.实验分组及处理:采用自身对照,将同一创面分成3个大小相近的实验区域。对照组A,愈合全程使用1% SD-Ag霜常规换药;实验组B,入院后即刻使用bFGF至创面愈合;实验组C,应用1% SD-Ag霜常规换药14天后单独使用bFGF至创面愈合。   3.观察指标:   (1)临床指标:肉眼观察创面的分泌物情况、.创缘变化以及上皮岛出现时间;直尺测量创面愈合的的大小;记录创面开始上皮化、愈合50%以及愈合100%的时间。   (2)病理形态学分析:对照组A、实验组B各10例,分别取烧伤后第14天、17天、19天、21天的创面组织制作病理切片,HE染色,观察烧伤创面组织学变化情况;计数毛细血管数以及成纤维细胞数,每例计数1张切片,每张切片计数10个高倍视野,取平均数。   结果:   1.肉眼观察创面愈合情况烧伤创面早期呈现小水泡型,且有部分表皮撕脱,创基呈现红白相间或苍白等真皮缺血坏死表现,伴大量渗出物,创缘红肿。实验组B伤后10天左右创缘红肿消退,创面坏死表皮及部分坏死真皮组织自行脱落,创缘伴有白色上皮组织向创面中心爬行,开始出现创缘的上皮化;对照组A和实验组C上述临床表现出现在伤后12天左右,且坏死组织脱落缓慢。愈合50%时,创面以毛囊或皮脂腺开口为中心出现多个上皮小岛,此后上皮小岛渐向四周扩展,且相互连接融合扩大,实验组较对照组上皮岛数量和面积较大,100%愈合时实验组愈合后的创面较平整,未见明显瘢痕增生。   2.创面愈合开始上皮化、愈合50%、愈合100%的时间情况实验组B出现上皮化的时间为(9.55±1.31)天,实验组C为(10.33±2.03)天,与对照组A(11.3±2.03)相比,无统计学意义(P>0.05)。   实验组B愈合50%时间为(15.0±1.70)天,实验组C为(16.2±1.50)天,较对照组A(19.0±2.40)天明显减少(P<0.05);实验组B与实验组C实验组B创面100%愈合时间为(22.0±1.50)天,实验组C为(22.3±1.20)天,与对照组A相比明显缩短(25.0±1.90,P<0.05);实验B与实验组C相比差异没有统计学意义(P>0.05)。   结果提示能够使深Ⅱ°烧伤创面愈合时间缩短3-5天。   3.病理学分析:   (1)组织学观察:显微镜下观察,伤后14天对照组A、实验组B伤口均有大量炎性渗出物,实验组B可见少量毛细血管和成纤维细胞,周边皮下组织充血,水肿,炎性细胞浸润;伤后第17天,对照组A肉芽组织长入,实验组B肉芽组织增生明显,且表皮增生明显;伤后第19天,对照组A肉芽组织生长明显,表皮开始增生覆盖伤口表面的大部分,创面未完全覆盖,实验组B则肉芽组织更明显致密,表面己被增生的表皮完全覆盖,创面愈合;伤后21天,对照组A肉芽组织明显增多,表皮开始覆盖创面,实验组B肉芽组织逐渐成熟,开始向瘢痕过渡。结果提示bFGF可以促进肉芽组织生成,促进创面愈合。   (2)定量分析:伤后14、17、19、21天计数毛细血管数和成纤维细胞数,实验组B均显著多于对照组A(P<0.05)。提示bFGF可以促进毛细血管新生和成纤维细胞增生。   结论:   1.bFGF可以促进深Ⅱ°烧伤创面愈合。   2.bFGF可以诱导毛细血管、成纤维细胞增生,肉芽组织生成,这可能与其促进深Ⅱ°烧伤创面愈合有关。   3.深Ⅱ°烧伤1%SD-Ag常规治疗14后再使用bFGF为科学合理的给药方案。
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