【摘 要】
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3-酮-井冈羟胺A C-N裂解酶是井冈霉胺生产中的三个关键酶之一,井冈霉胺是一种重要的医药中间体,被广泛应用与糖苷酶抑制剂的生产上。本文从一株能降解井冈霉素的霉菌出发,通
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3-酮-井冈羟胺A C-N裂解酶是井冈霉胺生产中的三个关键酶之一,井冈霉胺是一种重要的医药中间体,被广泛应用与糖苷酶抑制剂的生产上。本文从一株能降解井冈霉素的霉菌出发,通过形态鉴定和18S rDNA分子鉴定,得出该菌种属于青霉属斜卧青霉。本文还考察了各种培养条件对3-酮-井冈羟胺A C-N裂解酶活性的影响,得出最佳碳源为井冈霉素A,最佳氮源为硫酸铵,最佳pH和最适温度分别为7.0和30℃。在最佳培养条件下,产酶能力能高了53%,培养时间缩短到5天。通过各种硫酸铵沉淀,离子交互层析,疏水层析等纯化手段,得到了电泳纯的纯酶,收率和相对酶活分别为32.2%和12.89 U/mg.经过SDS-PAGE凝胶电泳,测定纯酶的分子量为21.6 KDa。酶的最适pH和最适反应温度分别为7.5和40℃。酶的热稳定性比较差,在50℃下放置100分钟基本检测不到酶活。该裂解酶受到Hg2+,Ni2+,pb2+,Sn2+等金属离子的抑制,Ca2+能促进酶活,
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