【摘 要】
：
目的:在肿瘤微环境（Tumor microenvironment,TME）中,T细胞的功能障碍严重影响了免疫治疗的临床效果,目前对肿瘤微环境中的免疫抑制机制还有许多未知之处。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（Tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL）可有效诱导细胞凋亡,目前已报道TRAIL+星形胶质细胞可有效诱导T细胞凋
论文部分内容阅读
目的:在肿瘤微环境（Tumor microenvironment,TME）中,T细胞的功能障碍严重影响了免疫治疗的临床效果,目前对肿瘤微环境中的免疫抑制机制还有许多未知之处。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（Tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL）可有效诱导细胞凋亡,目前已报道TRAIL+星形胶质细胞可有效诱导T细胞凋亡,但肿瘤细胞表达的TRAIL对T细胞的影响还未作深入探究。本课题旨在探究肿瘤细胞表达的TRAIL对T细胞的影响及其作用机制,为改进临床免疫治疗策略提供新的视角和观点。方法:利用GEPIA数据库查询Tnfsf10表达较正常组织高的肿瘤类型及该基因与肿瘤患者预后的关系;体外实验中,q RT-PCR和Western Blot检测肿瘤细胞的Tnfsf10及T细胞Tnfrsf10b的表达情况;流式细胞术检测单独培养及与4T1或4T07共培养24h及48h的活化的CD4+T细胞PI比例;流式细胞术检测Control组、4T07-vector组及4T07-OE组活化的CD4+T细胞PI比例;Western Blot检测以上三组活化的CD4+T细胞不同死亡通路相关关键蛋白表达情况;流式细胞术检测以上三组活化的CD4+T细胞凋亡情况、Caspase-3抑制剂、MLKL抑制剂及DR5阻断抗体干预4T07-vector组及4T07-OE组后活化的CD4+T细胞的凋亡改变情况。体内实验中,选取体重为18-20g的雄性C57BL/6小鼠,皮下注射正常培养的MC38及过表达TRAIL的MC38以建立荷瘤小鼠模型。于建模14天后测量两组小鼠的肿瘤体积;分离并称取相同重量的肿瘤组织并提取肿瘤浸润性淋巴细胞,流式细胞术检测以上两组CD45+细胞中CD4+T细胞及CD8+T细胞比例变化及CD4+T细胞凋亡改变情况。结果:GEPIA数据库显示,多种肿瘤细胞TRAIL的表达高于正常组织,PAAD患者的Tnfsf10表达情况与预后呈负相关;体外实验中,EL4、4T07及4T1中的TRAIL表达水平较高及活化的CD4+T细胞DR5表达水平较高;与4T1或4T07共培养24h或48h的活化的CD4+T细胞较单独培养的活化的CD4+T细胞PI比例增加;Control组、4T07-vector组及4T07-OE组活化的CD4+T细胞的PI比例依次增加;4T07-vector组及4T07-OE组活化的CD4+T细胞Caspase-3被剪切及MLKL被磷酸化;Control组、4T07-vector组及4T07-OE组活化的CD4+T细胞凋亡比例依次增加;Caspase-3抑制剂及MLKL抑制剂轻微降低了4T07-vector组活化的CD4+T细胞的凋亡比例及显著降低了4T07-OE组活化的CD4+T细胞的凋亡比例;DR5阻断抗体轻微降低了4T07-vector组活化的CD4+T细胞的凋亡比例及显著降低了4T07-OE组活化的CD4+T细胞的凋亡比例。体内实验中,MC38-OE组较MC38组的肿瘤体积增大、CD4+T细胞占CD45+细胞的比例降低、CD8+T细胞占CD45+细胞的比例轻微降低、CD4+T细胞凋亡比例增加。结论:肿瘤细胞表达的TRAIL分子可通过TRAIL-DR5信号诱导T细胞死亡;TRAIL诱导T细胞死亡的方式包括凋亡及程序性坏死。
其他文献
滇池生态修复是高原湖泊生态治理的典型案例，经历了三个阶段：一是早期局部、传统的表征修复，主要采用植树造林、法制治污、水体置换等措施；二是转型期的边污边治，主要采取湿地建设、环湖截污、雨污分流等方法，以实现水体的自我净化；三是生态文明建设阶段从工程治理到流域治理的全方位修复，持续采取环湖截污、污水处理及资源化利用、生态协同修复等手段。滇池生态治理的经验显示，本土化及全球生态整体观应该成为湖泊生态修复
目的:以表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI）为代表的靶向治疗药物在晚期非小细胞肺癌的治疗中应用广泛,然而获得性耐药的出现是制约EGFR-TKI临床应用的最大瓶颈。放射治疗是肺癌的有效治疗手段,但缺乏EGFR-TKI联合放疗最佳时机及分子机制的共识。前期研究发现在EG
目的:p21是细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂家族中的重要成员。研究表明,p21可以调节多种肿瘤对化疗药物的耐药和敏感性。本文主要研究了p21在结直肠癌（Colorectal carcinoma,CRC）中的特征,以及p21表达水平对氯喹（Chloroquine,CQ）诱导细胞死亡的影响和机制。方法:（1）通过多种生物信息数据库网站的分析和人结肠癌组织芯片免疫组织化学（Immunohistochemi
目的:检测CIBP模型大鼠背根神经节（dorsal root ganglion,DRG）中TTX-S钠通道的表达,CIBP模型大鼠脊髓中TTX-S钠通道、神经胶质细胞及促炎因子的表达。探究从TTX对CIBP模型大鼠镇痛作用及可能的脊髓机制。方法:将walker256细胞移植到成年雌性大鼠的右后侧胫骨中进行CIBP模型建立,皮下注射或鞘内注射TTX对CIBP大鼠进行干预。用q PCR方法检测CIBP
目的:顺铂作为一种常见的抗肿瘤药物,可治疗多种恶性肿瘤,但其耳毒性、肾毒性及神经毒性等副作用成为了其在临床应用的阻碍。目前普遍认为,顺铂耳毒性损伤的机制主要是氧化应激、DNA损伤和内质网应激导致。大量研究证明核因子红系2相关因子2（Nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2）在顺铂耳毒性中发挥保护作用。目前已有新的研究表明顺铂可以通过铁死亡方式诱导体内外毛细胞发
目的:舒尼替尼作为最早应用的口服靶向药之一,在肾细胞癌的治疗中显示出了良好的疗效,显著延长了晚期肿瘤患者的生存期。舒尼替尼作为受体酪氨酸激酶抑制剂,主要通过阻断血管生成、抑制肿瘤细胞增殖及诱导肿瘤细胞死亡来发挥抗肿瘤作用。但随着治疗的进行,肿瘤也会进化出对舒尼替尼的药物抗性,从而限制了药物的治疗效果。尽管以往的研究已经对舒尼替尼药物抗性的机制进行了深入研究,但多聚焦于肿瘤细胞内源性的抗性机制。对于
目的:慢性应激可以导致痛觉过敏,并且疼痛的发生机制在雌、雄群体中存在性别二态性现象。另外,肠道菌群参与疼痛的发生也得到了证实。然而,肠道菌群是否在慢性束缚应激（chronic restraint stress,CRS）诱发的痛觉过敏中发挥作用且存在性别差异尚未被探讨。因此,本研究欲探究肠道菌群在慢性应激诱发痛觉过敏中的作用及其与性别二态性的关系。方法:本研究采用连续14天的CRS模型,通过测量雌、
＜正＞在2021年的中国航展上,解放军第一款专业电子战飞机歼-16D首次公开亮相。细心的你一定发现了,歼-16D浑身带“刺”,外形有些另类。它的本领也不一般,拳打隐形战机,脚踢防空雷达,样样不在话下。今天,就让丁满带你近距离认识一下这位神秘的新战鹰!“信号切割机”这些“尖刺”名曰刀状天线,矗立在机身和电子吊舱之上,是用来接收和发送信号的。歼-16D能一口气携带6个电子吊舱,可以尽情施展电子战能力。
目的:多项研究显示在炎症发生时,细胞内产生错误折叠蛋白,内质网应激发生,肌醇需要酶1α（Inositol-requiring enzyme 1,IRE1α）介导的经典通路在消除内质网应激和炎症免疫中起重要作用,IRE1α基因的缺失会导致更加严重的内质网应激以及炎症反应。音猬因子（Sonic hedgehog,Shh）通路被证明在炎症中发挥重要抗炎作用并积极参与炎症后机体的稳态维持,组织修复。通过探
目的:FGFR信号通路异常在中国人群结直肠癌中的比例接近30%,FGFR信号通路异常与结直肠癌发生发展及预后不良相关,课题组前期初步分析发现PAI-1表达可能与FGFR信号通路相关。本研究旨在进一步探索FGF/FGFR2信号通路对结肠癌PAI-1表达的调控机制,并探索PAI-1对结肠癌免疫微环境的影响。方法:（1）通过TCGA和GEO数据库（GSE164191）获取结直肠癌患者表达谱数据及对应临床