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目的:通过考察黄芪葛根汤总黄酮、总皂苷对糖尿病大鼠血糖、血脂、炎性细胞因子含量及骨骼肌胰岛素、脂联素信号转导通路上相关因子的影响,初步探讨总黄酮、总皂苷配伍调节糖尿病大鼠糖脂代谢及炎症反应可能的作用机制,为寻找抗糖尿病药物潜在的作用靶点提供实验依据。材料与方法:86只SPF级雄性SD大鼠按照血糖随机分为6组,即正常组(n=11)、模型组(n=15)、阳性对照组(n=15)、黄芪葛根汤总黄酮组(n=15)、黄芪葛根汤总皂苷组(n=15)、黄芪葛根汤总黄酮+总皂苷组(n=15)。除正常组外,其余各组均一次性ig链脲佐菌素(STZ)46mg/kg诱导糖尿病模型。总黄酮组、总皂苷组、总黄酮+总皂苷组分别按0.106、0.074、0.180g/kg剂量ig给药;阳性对照组给予金芪降糖片混悬液1.47g/kg;正常组、模型组给予等体积蒸馏水10m L/kg,各组连续给药30d。采用血糖仪检测血糖;生化分析仪检测血清胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测骨骼肌胰岛素(Ins)、脂联素(ADPN)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-12(IL-12)、白细胞介素-15(IL-15)含量;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测骨骼肌磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B-2(Akt2)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和脂联素受体1(Adipo R1)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)m RNA表达。采用17.0版本的统计产品与服务解决方案(SPSS)软件进行实验数据分析,检验水准α=0.05。结果:1.对糖尿病大鼠血糖的影响模型组大鼠血糖水平明显升高(P<0.05);总黄酮组、总皂苷组大鼠血糖水平均明显降低(P<0.05),总黄酮、总皂苷之间未呈现交互作用(P>0.05)。2.对糖尿病大鼠血脂的影响(1)对糖尿病大鼠血清CHO水平的影响:模型组大鼠血清CHO水平明显升高(P<0.05);总黄酮组大鼠血清CHO水平明显降低(P<0.05),总皂苷组大鼠降低作用不明显,总黄酮、总皂苷之间未呈现交互作用(P>0.05)。(2)对糖尿病大鼠血清TG水平的影响:模型组大鼠血清TG水平明显升高(P<0.05);总黄酮组、总皂苷组大鼠血清TG水平均明显降低(P<0.05),总黄酮、总皂苷之间存在交互作用(P<0.05),但合用不如单一用药。3.对糖尿病大鼠骨骼肌Ins、ADPN含量的影响(1)对糖尿病大鼠骨骼肌Ins含量的影响:模型组大鼠骨骼肌Ins含量明显降低(P<0.05);总黄酮组、总皂苷组大鼠骨骼肌Ins含量均明显升高(P<0.05),总黄酮、总皂苷之间存在交互作用(P<0.05),且合用比单一用药好。(2)对糖尿病大鼠骨骼肌ADPN含量的影响:模型组大鼠骨骼肌ADPN含量明显降低(P<0.05);总黄酮组、总皂苷组大鼠骨骼肌ADPN含量均明显升高(P<0.05),总黄酮、总皂苷之间存在交互作用(P<0.05),但合用不如单用总黄酮。4.对糖尿病大鼠骨骼肌TNF-α、IL-12、IL-15含量的影响(1)对糖尿病大鼠骨骼肌TNF-α含量的影响:模型组大鼠骨骼肌TNF-α含量明显升高(P<0.05);总黄酮组、总皂苷组大鼠骨骼肌TNF-α含量均明显降低(P<0.05),总黄酮、总皂苷之间存在交互作用(P<0.05),但合用不如单用总黄酮。(2)对糖尿病大鼠骨骼肌IL-12含量的影响:模型组大鼠骨骼肌IL-12含量明显升高(P<0.05);总黄酮组、总皂苷组大鼠骨骼肌IL-12含量明显降低(P<0.05),总黄酮、总皂苷之间存在交互作用(P<0.05),但合用不如单用总黄酮。(3)对糖尿病大鼠骨骼肌IL-15含量的影响:模型组大鼠骨骼肌IL-15含量明显升高(P<0.05);总黄酮组、总皂苷组大鼠骨骼肌IL-15含量明显降低(P<0.05),总黄酮、总皂苷之间存在交互作用(P<0.05),但合用不如单用总黄酮。5.对糖尿病大鼠骨骼肌PI3K、Akt2、GSK-3βm RNA表达的影响(1)对糖尿病大鼠骨骼肌PI3Km RNA表达的影响:模型组大鼠骨骼肌PI3Km RNA表达明显降低(P<0.05);总黄酮组、总皂苷组大鼠骨骼肌PI3Km RNA表达均明显升高(P<0.05),总黄酮、总皂苷之间存在交互作用(P<0.05),但合用不如单用总黄酮。(2)对糖尿病大鼠骨骼肌Akt2m RNA表达的影响:模型组大鼠骨骼肌Akt2m RNA表达明显降低(P<0.05);总黄酮组大鼠骨骼肌Akt2m RNA表达明显升高(P<0.05),总皂苷组大鼠升高作用不明显,总黄酮、总皂苷之间存在交互作用(P<0.05),但合用不如单用总黄酮。(3)对糖尿病大鼠骨骼肌GSK-3βm RNA表达的影响:模型组大鼠骨骼肌GSK-3βm RNA表达明显升高(P<0.05);总黄酮组、总皂苷组大鼠骨骼肌GSK-3βm RNA表达均明显降低(P<0.05),总黄酮、总皂苷之间存在交互作用(P<0.05),但合用不如单用总黄酮。6.对糖尿病大鼠骨骼肌Adipo R1、AMPK、p38MAPKm RNA表达的影响(1)对糖尿病大鼠骨骼肌Adipo R1m RNA表达的影响:模型组大鼠骨骼肌Adipo R1m RNA表达明显降低(P<0.05);总黄酮组大鼠骨骼肌Adipo R1m RNA表达明显升高(P<0.05),总皂苷组大鼠升高作用不明显,总黄酮、总皂苷之间未呈现交互作用(P>0.05)。(2)对糖尿病大鼠骨骼肌AMPKm RNA表达的影响:模型组大鼠骨骼肌AMPKm RNA表达明显降低(P<0.05);总黄酮组大鼠升高作用不明显,总皂苷组大鼠骨骼肌AMPKm RNA表达明显升高(P<0.05),总黄酮、总皂苷之间存在交互作用(P<0.05),但合用不如单用总皂苷。(3)对糖尿病大鼠骨骼肌p38MAPKm RNA表达的影响:模型组大鼠骨骼肌p38MAPKm RNA表达明显升高(P<0.05);总黄酮组、总皂苷组大鼠骨骼肌p38MAPKm RNA表达均明显降低(P<0.05),总黄酮、总皂苷之间存在交互作用(P<0.05),但合用不如单用总黄酮。结论:1.黄芪葛根汤总黄酮、总皂苷配伍可明显降低糖尿病大鼠血糖水平,改善骨骼肌糖代谢紊乱,可能与Ins介导的PI3K/Akt2/GSK-3β通路有一定的相关性。2.黄芪葛根汤总黄酮、总皂苷配伍可明显降低糖尿病大鼠血脂水平,改善骨骼肌脂代谢紊乱,可能与ADPN介导的Adipo R1/AMPK/p38MAPK通路有一定的相关性。3.黄芪葛根汤总黄酮、总皂苷配伍可能通过减少炎性细胞因子TNF-α、IL-12、IL-15的分泌,抑制骨骼肌炎症反应,改善胰岛素抵抗。4.黄芪葛根汤总黄酮、总皂苷配伍调节糖尿病大鼠骨骼肌糖脂代谢及炎症反应的相关因子均存在交互作用(除Adipo R1外)。调节Ins水平时,总黄酮、总皂苷配伍具有协同增效作用;调节ADPN、PI3K、Akt2、GSK-3β、p38MAPK、TNF-α、IL-12、IL-15水平时,总黄酮较总皂苷及其配伍更具优势;调节AMPK水平时,总皂苷较总黄酮及其配伍更具优势。由此提示,组分配伍产生的药效作用存在协同、拮抗或各自为用等关系。