【摘 要】
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胚胎干细胞移植修复治疗脊髓损伤的实验研究目的:该课题旨在以小鼠ES细胞为材料和SCI小鼠为模型,建立一套诱导方案使ES细胞的衍生细胞能够在其受损脊髓内分化为神经元、神经
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胚胎干细胞移植修复治疗脊髓损伤的实验研究目的:该课题旨在以小鼠ES细胞为材料和SCI小鼠为模型,建立一套诱导方案使ES细胞的衍生细胞能够在其受损脊髓内分化为神经元、神经胶质细胞,探讨实验研究中胚胎干细胞的衍生细胞移植后在损伤脊髓中的成活、分化、迁移状况和对神经功能的影响.方法:1小鼠ES细胞S8(XY带Lac-z标记基因)诱导分化:利用一些神经细胞发育过程中发育调控因子(如RA、bFGF、EGF等)间的不同组合及不同阶段的处理诱导ES细胞分化的ES衍生细胞.2取8周的C57/BL6J小鼠T12棘突为中心,用纤维剪刀横断脊髓,制成脊髓半切模型,用胚胎干细胞诱导的衍生细胞植入损伤脊髓周围的椎管内,并设不同对照.术后受试鼠笼养观察,以多种手段从功能及结构两方面检测脊髓的再生:常规冰冻切片,光镜观察植入区的组织结构;利用酶学及免疫组化等方法检测外源性细胞存在,然后进行斜板试验、BBB评分等行为学观察;来观察其细胞在损伤脊髓中的存活、分化、迁移以及对功能恢复的影响.结果:经胚胎干细胞诱导的衍生细胞在损伤区能存活,并进行长距离迁移到损伤区域,并能分化为神经元和神经胶质细胞且与周围组织形成整合,提高生存率.结论:移植的胚胎干细胞的衍生细胞能在损伤区域替代受损的神经元及神经胶质细胞,并在神经功能和生存率方面上优于对照组.
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