草萄(Fragaria ×ananassa,DDuch.)是一种经济价值较高的园艺植物,目前已在世界各地广泛种植,由于草莓栽培主要依靠匍匐茎及其分枝进行无性繁殖,容易引起草莓衰退病,导致草莓叶片畸形、叶脉皱缩、植株矮化等症状,从而大大降低了草莓果实的产量和品质,严重影响了草莓的经济价值。目前河南省草莓病毒病的发生分布情况尚不清楚,鉴于此,本研究通过采集河南省5个地区的草莓病叶,确定了河南省引起草莓病毒病的主要病原,建立了5种草莓病毒病的多重PCR检测体系,同时探索了实验室已有的两种主要草莓病毒的cDNA克隆接种体系,为河南省草莓病毒病的防控提供了理论依据和技术支撑。主要实验结果如下:通过采集河南省郑州市、新乡市、洛阳市、焦作市和平顶山市的草莓叶片病样,利用设计的草莓病毒病特异性引物进行RT-PCR检测,结果表明郑州市引起草莓病毒病的病原主要是草莓镶脉病毒(Strawberry vein banding virus,SVBV)、草莓坏死休克病毒(Strawberrynecrotic shock virus,SNSV)和草萄白化病毒(Strawberry pallidosiis-assodatedd virus,SPaV)。新乡市引起草莓病毒病的病原主要有草萄斑驳病毒(Strawberry mottle virus,SMoV)、SVBV、SPaV。洛阳市引起草莓病毒病的病原主要有草莓轻型黄边病毒(Strawberry virus,SMYEV)、SVBV 和 SMoV。平顶山市引起草莓病毒病的病原主要有SVBV、SMYEV。焦作市引起草莓病毒病的病原主要有SVBV。在五个地区中都能检测到SVBV,在洛阳市发现了 SMoV和SVBV的复合侵染,在平顶山市发现了 SVBV和SMYEV的复合侵染。基于SPaV为国内首次发现,通过分段扩增的方式获得了 SPaV的全长序列,RNA1 为 8066 bp,RNA2 为 7978 bp。通过扩增SVBV不同分离物的cp全长阅读框,进行系统进化分析,结果表明,5个分离物与中国的其他分离物都聚为一个大支,加拿大分离物单独一支,郑州分离物与合肥分离物的亲缘关系最近。通过扩增SNSV的cp全长阅读框,进行系统进化分析,结果表明郑州市的SNSV分离物与美国的弗罗里达州(GenBank No.AY363235.1)的SNSV分离物亲缘关系最近,与美国和澳大利亚的分离物聚为一个大支,而日本分离物单独形成一个分支。此外,根据已获得的5种草莓病毒的序列,设计特异性引物,通过摸索退火温度和时间,建立了5种草莓病毒的多重PCR扩增体系,扩增长度分别为SVBV 816 bp、SMoV 620 bp、SMYEV 444 bp、SPaV 276 bp和SNSV 134 bp。通过真空抽滤和摩擦接种SMYEV和SMoV,结果表明两次摩擦接种SMoV的接种效率分别为2/3和1/3,两次真空抽滤SMoV接种效率分别为1/4和1/2,两次真空抽滤SMYEV接种效率分别为1/6和2/11。通过农杆菌浸润本生烟表明两种病毒在接种叶上都能侵染,而在系统叶片中未能检测到。