枯草芽孢杆菌微生态制剂的研制

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益生菌作为一类新型添加剂,具有无毒、无副作用、促进肠内菌群生态平衡等优点。枯草芽孢杆菌因其具有较强的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶等多种有效的酶促活性,可作为益生菌在动物饲料添加剂中应用。本研究以实验室从海参肠道中筛选的HS-A38枯草芽孢杆菌为益生菌菌株,采用液体发酵,对益生菌菌株的发酵培养基和发酵培养条件进行了优化,通过单因素试验和正交试验确定了该菌株发酵培养基的最佳成分,即葡萄糖1.0%、牛肉膏1.5%.K2HP040.5%;最适发酵条件为发酵温度30℃,初始pH值7.2,接种量4%,发酵时间36-38h。经过优化后发酵液的活菌浓度可达到3.98×109cfu/ml。再以1%海藻酸钠为壁材,4%氯化钙作为固化剂,将发酵后收集的枯草芽孢杆菌菌体制成微胶囊制剂,采用活菌计数法进行该微胶囊制剂的稳定性试验。结果显示,分别采用乳化法和挤压法包埋制备的微胶囊制剂,在4℃条件下液体保存30天,活菌存活率分别为95.4%和97.5%;保存60天,其活菌存活率分别为53.4%和56.9%;保存90天,其活菌存活率分别为28.7%和30.5%,在4℃条件下冻干后保存30天,活菌存活率分别为92.4%和93.7%;保存60天,其活菌存活率分别为57.1%和60.8%;保存90天,其活菌存活率分别为31.4%和32.9%。另外,实验还发现采用这两种方法制备的微生态制剂,其菌体在各个时期的存活率均高于未经微胶囊化的原始样品,但乳化法制备工艺相对较为简单且微胶囊形成速度较快,因此预计乳化法将更适合于大规模工业化生产。本研究采用的微胶囊技术大大提高了该益生菌株的活菌保存期,为今后该菌株微生态制剂的工业化生产奠定了基础和理论依据。
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