论文部分内容阅读
胃黏膜经常接触高浓度胃酸，受到胃蛋白酶及以幽门螺杆菌(Hp)为主的微生物、反流入胃腔的胆汁和胰酶、以及乙醇、药物和其它有害物质的侵袭。但在正常情况下，胃黏膜能够抵御这些侵袭因素的损害作用，维护黏膜的完整性。这是因为胃黏膜具有一系列防御和修复机制，包括粘液—碳酸氢盐屏障、黏膜屏障、黏膜血流量、细胞更新、细胞因子和前列腺素等。胃黏膜损伤的发生就是由于对胃黏膜有损害作用的侵袭因素的增强，或黏膜自身防御—修复因素的消弱，抑或是两者兼有而引起的结果。因此，对胃黏膜损伤的治疗，除要重视去除对胃黏膜有损害作用的侵袭因素外，还要加强胃黏膜的防御功能。胃黏膜保护在胃黏膜炎症性疾病如消化性溃疡和慢性胃炎发生、发展以及转归中起着重要作用，因而近年来，胃黏膜保护及其机制日益受到人们的重视。本次实验选用两种黏膜保护剂—替普瑞酮和云母，并建立实验性乙酸致大鼠胃溃疡模型及实验性大鼠慢性胃炎模型，以后者为研究平台，探讨胃黏膜保护对胃黏膜炎症性疾病的影响及作用机制。 材料与方法 选用清洁级健康、性成熟、雄性Wistar大鼠120只，由浙江省药品检验所实验动物中心提供。 制备实验性乙酸致大鼠胃溃疡模型(70只)：大鼠禁食24h，用1％戊巴比妥钠按50mg／kg体重腹腔注射麻醉，常规消毒，自剑突向下沿腹中线剪口约2cm，自肝脏后找出胃，将胃移出腹腔，用微量注射器将0.05ml20％的乙酸注射至胃窦部前壁浆膜下近肌层处，待出现直径约3mm半透明的白斑后，将胃送还腹腔，以大网膜包裹，缝合腹膜、肌层和皮肤。制模后3天，模型组即处死，而各治疗组大鼠分别以各自药物治疗。具体药物和方法为生理盐水对照组以生理盐水灌胃；替普瑞酮治疗组以替普瑞酮溶液200mg／kg·d灌胃；奥美拉唑治疗组以奥美拉唑15mg／kg·d灌胃；普瑞酮+奥美拉唑治疗组以替普瑞酮溶液200mg／kg·d联合奥美拉唑15mg／kg·d灌胃；云母治疗组浙江大学硕士学位论文以云母1 60mg/kg·d灌胃。共计14天。在观察大鼠一般情况、胃标本大体情况并计算溃疡指数和溃疡抑制率后，取血标本以放射免疫法PGEZ和EGF。以钝刀刮取全胃的1/6胃猫膜，测定胃勤膜组织氨基己糖水平。剩下胃猫膜组织标本制成HE染色、VG染色、AB一PA染色切片以及进行EGFR、bFGF的免疫组织化学染色。在切片上观察胃勃膜组织学情况，并通过计算机图像分析系统测定再生勃膜厚度、再生乳膜内呈囊状扩张的腺体之数量、肉芽组织炎症细胞浸润数量、肉芽组织微血管数量、再生勃膜粘液含量、肉芽组织胶原纤维含量以及胃乳膜EGFR、bFGF及溃疡基底肉芽组织bFGF表达水平。 综合应用下列因素处理制成实验性大鼠慢性胃炎模型(50只):前3周每天2%水杨酸钠Zml灌胃，l次/天，给药前后1小时禁食禁水，共6周，前3周自由进食进水，后3周单日禁食不禁水，双日足量进食进水。在第l周由20001/L去氧胆酸钠代水自由饮用。制模后，模型组以生理盐水灌胃;三九胃泰组以三九胃泰冲剂167mg/kg·d灌胃;低剂量云母组以云母60mg/kg·d灌胃;中剂量云母组以云母12Omg/kg·d灌胃;高剂量云母组以云母240mg/kg·d灌胃，共计2周。另设正常组，未予任何药物及饮食干预，饲养8周。在观察大鼠一般情况、胃标本大体情况后，取血标本以放免法测定PGE:。并取胃组织标本制成HE、AB染色切片，观察胃勃膜炎症程度、豁膜腺体数量及形态，同时观察有无肠上皮化生、假性幽门腺化生、不典型增生、腺瘤、类癌、腺癌的发生情况。并用半定量法计算胃窦乳膜炎症指数。另每组随机各抽取大鼠一只，以扫描电镜观察其胃钻膜细胞排列情况，有无细胞破馈、脱落或出血，以及表面被筱粘液情况。同时观察云母在胃勃膜的吸附情况。 应用SPSS 10.0统计软件进行统计分析采用完全随机设计成组资料的方差分析(0二一wayANOvA)，以尸值小于0.05为有显著意义，小于0.01为有非常显著意义。结果 通过对大鼠一般情况、胃大体标本、组织光镜及电镜下观察并结合血液、胃液等生化指标，认为模型l—实验性乙酸致大鼠胃溃疡模型和模型2—实验性大鼠慢性胃炎模型均造模成功。 对模型1研究结果发现:胃勃膜保护剂能促进氨基己糖分泌:替普瑞酮治疗组(120.66士27.21陀/瑰组织净重)、云母治疗组(118.26士14.01魄/瑰组织净重)较模型组(69.77士15.36陀/瑰组织净重)和生理盐水对照组(70.31士30.91瑰/瑰组织净重)均有明显增加(尸<0.01)。其也能促进再生勃膜细胞分泌中性粘液:在AB一PAS染色切片上，测量再生翰膜PAS染色阳性面积百分数发现替普瑞酮治疗组(44.92士10.83%)、云母治疗组(48.00士14.34%)较生理盐水对照组(28.60士8.57%)明显增加(尸<0.01)。胃猫膜保护剂能加强PGEZ的合成与分泌:浙江大学硕士学位论文替普瑞酮治疗组(195.55士88.67 pg/ml)、云母治疗组(180.51士96.39 pg/ml)较模型组(81.49士34.53 pg/ml)和生理盐水对照组(102.27士26.78 pg/ml)均有明显增加(P<0.05)。其能改善应激状态下的胃猫膜血流:在200倍光镜下计数肉芽组织脚D发现在每个视野中替普瑞酮治疗组(12.11士2.68个)、云母治疗