热应激(Heat stress,HS)是影响家禽养殖业健康发展的重要问题之一,会导致家禽各组织脏器损伤,严重时可造成猝死。茶多酚(Tea polyphenols,TP)具有抗氧化、抗癌、抑菌、抗炎等生物学功能,但TP对热应激心肌细胞的保护作用及其作用机制尚未有明确的阐述。本研究用300日龄海兰褐蛋鸡和H9C2心肌细胞构建热应激试验模型,重点探讨TP对热应激条件下心肌细胞的保护作用,结合网络药理学富集TP作用靶点探讨保护机制,为临床上筛选抵抗热应激损伤的药物提供理论参考。本试验将80只海兰褐蛋鸡随机分为8组,每组10只鸡。先进行一周环境适应,然后进入一周给药期,给药组0.2 g/L TP溶液,自由饮用,其余组自由饮水。最后对所有鸡只进行0 d、0.5 d、2 d和5 d的36℃~38℃热应激处理,热应激期间给药组继续饮用0.2 g/L TP,每天对鸡蛋进行收集。到对应热应激时间点对鸡只进行剖杀,收集试验所需的血清与组织样品;10 mg/L茶多酚作用于H9C2心肌细胞,对细胞进行42℃±1℃0 h、2 h、3 h、5 h热应激处理,收集细胞样品。通过对蛋品质检测,发现饮用0.2 g/L TP可抑制热应激导致的蛋品质下降;对蛋鸡心肌细胞病理学检查,结果显示与对应的热应激组相比,饮用0.2 g/L TP组受试鸡未出现明显的心肌病理现象;对血清中LDH、CK、CK-MB和TNF-α检测,结果发现TP降低血清中损伤指标LDH、CK、CK-MB和TNF-α,对Caspase 3蛋白检测,TP抑制了热应激条件下Caspase 3蛋白上调,以上结果表明TP有缓解热应激损伤的作用。为确定TP缓解热应激损伤的保护作用机制,我们选取心肌细胞为主要研究对象,通过网络药理学分析的作用靶点,对血清中氧化损伤指标MDA检测,抗氧化能力指标SOD、GSH-PX、机体总抗氧化能力T-AOC以及抗氧化作用中重要因子Nrf2检测,结果表明TP可提高热应激条件下蛋鸡血清中T-AOC和GSH-PX含量,对SOD的影响不显著,降低MDA含量,提高蛋鸡心肌细胞Nrf2蛋白水平。TP作用下H9C2心肌细胞中T-AOC、SOD上调,HO-1转录水平上调,Nrf2蛋白水平上调,TP通过增强抗氧化能力缓解心肌细胞热应激损伤;通过对蛋鸡心肌细胞与H9C2心肌细胞内Hsps的检测,探究TP激活热休克反应缓解心肌细胞热应激损伤的机制,结果表明TP可在不同热应激时间点提高CRYAB、Hsp27、Hsp70蛋白水平,TP可通过激活热休克反应缓解热应激对心肌细胞的损伤。综上,TP可有效缓解热应激对心肌细胞的损伤,对热应激条件下的心肌细胞有良好的保护作用,其可通过增强抗氧化能力,激活热休克反应来缓解热应激对心肌细胞的损伤,抵抗热应激的侵害。本研究为TP相关药物的研发提供了理论依据。