【摘 要】
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目的:探究藏红花素对孤独症模型鼠学习记忆及海马神经元数量、脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophicor,BDNF）、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（cyclic AMP response element bingding protein,CREB）表达的影响。从而为藏红花素治疗孤独症提供新思路、新方向。方法:随机选取健康清洁级Wistar雌性大鼠20只,参照Schnei
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目的:探究藏红花素对孤独症模型鼠学习记忆及海马神经元数量、脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophicor,BDNF）、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（cyclic AMP response element bingding protein,CREB）表达的影响。从而为藏红花素治疗孤独症提供新思路、新方向。方法:随机选取健康清洁级Wistar雌性大鼠20只,参照Schneider造模方法,于E12.5天腹腔注射丙戊酸钠（sodium valproate,VPA）600mg/kg,标记为VPA组孕鼠,所产下的仔鼠为孤独症模型组仔鼠;随机选取10只孕鼠腹腔注射同等剂量生理盐水,标记为NS组孕鼠,所产下的仔鼠为正常对照组仔鼠。随机选取7日龄孤独症模型组仔鼠80只,7日龄正常对照组仔鼠（NS组）40只;将孤独症模型组仔鼠随机分为两组即藏红花素组（CVPA组）40只,溶剂对照组（VPA组）40只;CVPA组仔鼠选取P7、P14、P21时间窗,分别标记为CVPA-1组、CVPA-2组、CVPA-3组,每日腹腔注射藏红花素50mg/kg,时长21天;VPA组和NS组仔鼠选取相同时间窗,分别记为VPA-1组、VPA-2组、VPA-3组、NS-1组、NS-2组、NS-3组,每日腹腔注射同等剂量的生理盐水,时长21天。分别观察藏红花素不同干预时间窗仔鼠的行为和学习记忆能力。应用尼氏染色、免疫荧光、免疫印迹及图像分析技术,观察藏红花素不同干预时间窗仔鼠海马神经元形态、Neu N阳性细胞数量及BDNF、CREB蛋白表达的变化。结果:（1）VPA组孕鼠孕期体重增加及产仔鼠数量均较NS组少（p<0.05）。（2）VPA组仔鼠睁眼时间较晚,方向趋向性能力降低;P7、P21、P28、P35、P42,VPA组仔鼠体重与NS组相比明显降低;P28,VPA组仔鼠刻板重复动作增加,社会交流减少;P28、P35、P42,VPA组仔鼠脑重增加,学习记忆能力降低。P7时间窗,VPA-1组仔鼠与NS-1组相比,海马Neu N阳性细胞数量增加（p<0.05）,BDNF、CREB蛋白表达升高（p<0.05）;P14和P28时间窗,VPA-2组和VPA-3组仔鼠分别与NS-2组和NS-3组相比,海马Neu N阳性细胞数量减少（p<0.05）,BDNF、CREB蛋白表达降低（p<0.05）（3）藏红花素干预后,CVPA组仔鼠与VPA组相比,体重增加（p<0.05）,脑重无差异（p>0.05）;藏红花干预时间窗为P7和P14时,CVPA-1组和CVPA-2组仔鼠分别与VPA-1组和VPA-2组相比,学习记忆能力提高（p<0.05）,海马Neu N阳性细胞数量增加（p<0.05）,BDNF、CREB蛋白表达升高（p<0.05）;藏红花素干预时间窗为P21时,CVPA-3组与VPA-3组相比,学习记忆能力、海马Neu N阳性细胞数及BDNF、CREB蛋白无明显差异（p>0.05）。结论:藏红花素干预能够改善孤独症模型鼠的学习记忆能力,增加海马Neu N阳性细胞数量;促进孤独症模型鼠海马BDNF、CREB蛋白表达;藏红花素对孤独症模型鼠的干预因用药时间窗不同效果不同,P7、P14干预时间窗有改善作用,P21干预时间窗效果不明显。
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