南、北五味子多糖的理化性质及生物活性研究

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五味子是我国传统中药,已有两千多年的用药历史,在许多古籍中均有记载。《中国药典》收录的五味子包括南五味子和北五味子。多糖是五味子重要的活性成分,本研究主要对南、北五味子多糖的理化性质、抗氧化活性及免疫作用进行比较研究,区分其理化性质及活性的差异,以指导临床合理用药,进而对五味子资源的利用与开发提供参考与依据。采用传统水提醇沉法提取南、北五味子多糖,分别命名为SSP和SCP;接着对二者的理化性质、抗氧化活性和免疫作用进行了体外试验。理化性质测定结果表明:SSP的糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量、多酚含量分别为51.04%、35.35%、12.81%、3.43%;SCP的分别为78.45%、12.55%、4.78%、3.28%。SSP和SCP除多酚含量无显著性差异外,糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量均具有显著性差异。SSP主要由半乳糖(34.6%),阿拉伯糖(22.3%),葡萄糖(15%),半乳糖醛酸(11.5%)组成;SCP中葡萄糖含量最高,达到67.6%,其次为甘露糖(11.7%),半乳糖(8.6%)。SSP和SCP分子量分别分布在1.7×105 Da和1.7×104 Da,相差较大。红外光谱图分析发现,SSP和SCP均具有多糖的特征吸收峰。活性研究结果表明:SSP对自由基的清除能力、对生物大分子的保护作用(对Cu2+/H2O2诱导的BSA蛋白氧化损伤的抑制作用)以及对H2O2诱导的人正常肝细胞氧化损伤的保护作用均显著强于SCP。以RAW264.7细胞为模型,对SSP和SCP处理免疫细胞后,其细胞活力、中性红吞噬能力、NO分泌量以及酸性磷酸酶活性比较,结果发现SCP的免疫活性强于SSP。对免疫活性较强的SCP用DEAE-52纤维素柱分离纯化,共得到三个组分,分别命名为SCP-I(0.436%)、SCP-II(0.08%)和SCP-III(0.126%);单糖组成测定结果表明:SCP-I只有葡萄糖,SCP-II由葡萄糖和半乳糖组成,SCP-III是一种酸性杂多糖;对得率与纯度最高的SCP-I组分GC-MS分析,发现该组分为1,4-连接的葡萄糖,淀粉碘化钾实验鉴定其为淀粉。对SCP去淀粉后测定单糖组成发现,去淀粉后的北五味子多糖(DS-SCP)中葡萄糖相对摩尔百分比减少了55.9%,而甘露糖、阿拉伯糖、半乳糖分别增加了19.7%、17%和14.8%。免疫活性结果表明,DS-SCP的免疫作用强于SCP。
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