前言自从发现三氧化二砷（As₂O₃）对复发性急性早幼粒细胞性白血病（APL）达到很高的缓解率以来，其己成为临床治疗APL的主要药物，随着其效应谱不断地被扩展，除APL外，近年来As₂O₃在实体瘤中亦有广泛研究，展示出良好的前景。As₂O₃也被证实具有诱导肿瘤细胞分化的作用。1，25-二羟基维生素D₃[1,25-（OH）₂VD₃，简称D₃]除了具有调节机体的钙磷代谢作用外，还具有抑制细胞增殖、诱导细胞分化的作用，是一种有前途的肿瘤细胞诱导分化剂。其在治疗恶性肿瘤方面的潜在作用已越来越被人们所重视，但就目前的应用情况而言，由于VD₃易引起高钙血症等副作用，其治疗恶性肿瘤的效果并不理想，为增强疗效，降低毒副作用，与其他药物联用成为现今主要的研究方向。药物联用可以降低用药浓度，减少毒副作用的产生，提高肿瘤细胞对药物的敏感性以及降低肿瘤细胞的耐药性。因此，小剂量具有抗肿瘤活性药物的联合应用是一种前景光明的治疗途径。本研究首次将As₂O₃和1,25-（OH）₂VD₃联合应用，以探寻一种治疗肺癌的新方法。研究目的通过对不同浓度的1,25-（OH）₂VD₃、As₂O₃及二者联合作用于肺癌细胞A549引起细胞增殖、生长抑制率、细胞周期及相关基因表达的改变进行研究，从细胞增殖、细胞周期及相关基因表达变化等方面探讨两种药物单独和联合应用对肺癌细胞的作用机制。以寻找一种有广泛应用前景的、相对无毒副作用的治疗肿瘤的新方法。研究方法体外培养肺癌细胞至指数生长期，加入不同浓度的As₂O₃、1,25-（OH）₂VD₃及As₂O₃+1,25-（OH）₂VD₃，作用一定时间后，采用MTT比色法检测增殖抑制率、流式细胞技术检测细胞周期、免疫组化法检测c-myc基因的表达变化，分析不同浓度的两种药物对肺癌细胞的增殖、周期及相关基因表达的影响。研究结果As₂O₃、1,25-（OH）₂VD₃及二者联合作用24-72小时，与阴性对照组相比，各处理组吸光度A值显著降低，具有剂量、时间依赖性，并且二者对肺癌细胞的增殖抑制存在协同作用。As₂O₃、1,25-（OH）₂VD₃及二者联合作用48小时，处于G₀／G₁期的细胞比例较阴性对照组显著增加，S期和G₂+M期的细胞比例减少，药物联用后作用增强。免疫组化检测细胞中c-Myc阳性信号定位于胞浆，各药物组的平均光密度（optical density，OD）值均较阴性对照组有所降低，说明两药对c-myc基因在肺癌细胞中的表达均具有下调作用，而且具有剂量依赖性，较低浓度的两药联用存在协同作用。结论不同浓度的As₂O₃、1,25-（OH）₂VD₃及两种药物的联合使用均可抑制A549的增殖，且随着浓度的增高和作用时间的延长抑制率增加，即呈时间、剂量依赖性，两药联用时具有明显的协同作用。As₂O₃和1,25-（OH）₂VD₃均可使细胞周期阻滞于G₀／G₁期，S期和G₂+M期比例降低，两药联用作用加强，这种作用可能与两种药物均可下调肺癌细胞c-Myc的表达有关。As₂O₃和1,25-（OH）₂VD₃对A549细胞存在诱导分化作用，细胞阻滞于G₀／G₁期可能是其机制之一。