目的:通过体外观察转化生长因子-β1（TGF-β1）对大鼠支气管成纤维细胞（RBFs）Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白分泌的影响,探讨TGF-β1及大鼠支气管成纤维细胞在慢性阻塞性肺疾病（COPD）气道纤维化中的作用。方法:取5-6周龄,150-180g左右雄性SD大鼠,快速分离其支气管,利用酶消化法+组织块粘壁法体外培养大鼠支气管成纤维细胞;取生长状态良好的第三代大鼠支气管成纤维细胞,以0ng/ml TGF-β1不同作用时间分别作为对照组,以TGF-β1浓度梯度5ng/ml、10ng/ml及20ng/ml,作用时间2h、12h、24h及48h作为实验组。收集细胞上清液,采用大鼠I型胶原蛋白（Col I）ELISA检测试剂盒及大鼠Ⅲ型胶原蛋白（Col III）ELISA检测试剂盒分别检测各组细胞上清液中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的水平。结果:1、利用酶消化法+组织块粘壁法进行细胞培养,细胞呈长梭形、三角形等,有突起。经鉴定该细胞抗波形蛋白（vimentin）染色呈阳性,成功分离并培养大鼠支气管成纤维细胞。2、选取第3代RBFs,用CCK-8检测其细胞增殖活性,检测OD_450nm值并绘制其生长曲线。以纵坐标为OD_450nm平均值,培养天数为横坐标做图。第1d～2d为细胞的适应期,生长相对缓慢。第3d～6d是细胞的对数生长期并且生长相对较快。第6d生长达到高峰,第7d细胞进入生长平台期,细胞增殖减慢,活性下降。生长曲线近似于“S”形。3、在0ng/ml TGF-β1条件下所观察大鼠支气管成纤维细胞在2h、12h、24h及48h I型胶原蛋白的表达水平分别为1.454±0.005ng/ml、1.664±0.016ng/ml、1.862±0.013ng/ml及1.982±0.017ng/ml,差异有统计学意义（P<0.05）;Ⅲ型胶原蛋白的表达水平分别为0.206±0.00 ng/ml、0.288±0.007ng/ml、0.354±0.008ng/ml及0.430±0.009ng/ml差异有统计学意义（P<0.05）。4、与对应0ng/ml TGF-β1组相比,在所有时间段内任意浓度TGF-β1组大鼠支气管成纤维I型胶原蛋白的表达增加（P<0.05）,且总体与TGF-β1浓度相关;但在2h时5ng/ml组I型胶原蛋白的表达高于10ng/ml组（P<0.05）;24h时10ng/ml与20ng/ml组差异无统计学意义（P>0.05）;在48h时10ng/ml组I型胶原蛋白的表达高于20ng/ml组（P<0.05）。5、与对应0ng/ml TGF-β1组相比,在所有时间段内任意浓度TGF-β1组大鼠支气管成纤维Ⅲ型胶原蛋白的表达增加（P<0.05）,且总体与TGF-β1浓度相关;但在2h时5ng/ml组Ⅲ型胶原蛋白的表达高于10ng/ml组（P<0.05）。结论:1、大鼠支气管成纤维细胞可利用酶消化法+组织块粘壁法进行培养,能为COPD气道重塑机制的体外研究提供实验基础。2、TGF-β1可促进大鼠支气管成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白合成,与时间及剂量相关。