伴随着当今社会人们的快节奏生活,由于胆固醇摄入过量引发的心脑血管疾病日益高发并严重威胁人类健康和生命。药物治疗是当前有效医治方式,但伴随着一系列副作用且效果不稳定,微生态制剂辅助药物治疗是一种安全有效的降血清胆固醇手段。本论文从生活在海平面300米以深大型海洋哺乳动物柏式中喙鲸内脏中分离出一株具高效降胆固醇功能的乳酸菌HJ-S2,从生长、益生、安全三方面特性对目标菌株进行综合评价研究,优化其发酵条件,从不同角度探讨其体外降解机制,最后构建高脂小鼠模型评估其在体内发挥的作用,以期为开发新型功能微生态制剂提供理论参考。实验结果如下:(1)菌株的分离筛选及性能研究。采用传统乳酸菌筛选法联合邻苯二甲醛法从喙鲸内脏中得到一株体外胆固醇降解率达48.82±0.21%的乳酸菌,且分泌胆盐水解酶,经鉴定为植物乳杆菌,并命名为HJ-S2(NCBI登录号:MK248728;CGMCC No:17720),构建了其进化发育树。对目标菌株HJ-S2进行三方面性能研究,首先研究了菌株HJ-S2生长特性,测定了菌株的生长曲线,HJ-S2具一定产酸能力且在衰亡期42 h时体外胆固醇降解率达到最高为45.06%。其次研究了菌株HJ-S2益生特性,结果显示HJ-S2分别在pH值3.0和含0.3%的胆盐环境中培养3 h,耐受率分别达82.73%、80.62%;HJ-S2游离胆酸释放量为3.35±0.19μmol/mL,显示出一定的去结合胆盐能力;且与人结肠癌HT-29细胞共培养后粘附细菌数为132.52±5.42,表现出较强的细胞粘附力。最后研究了HJ-S2安全特性,结果显示HJ-S2代谢物均能在不同程度上抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的生长,对大肠杆菌的抑制效果最好;HJ-S2对四环素、链霉素、利福平、氨苄西林、表现敏感,对青霉素、庆大霉素、红霉素、卡那霉素表现抗性,且不具溶血性。菌株体外胆固醇降解机制初步探讨。结果显示菌株在不同状态下降解效果和表现出的机制存在显著差异,生长细胞的胆固醇降解效果最优,主要是通过胞内对胆固醇的同化发挥降解作用;HJ-S2在MRS-CHOL培养基中生长能利用胆固醇改变细胞壁的韧性并显著提高其对超声波的抗性。(2)发酵条件优化。从培养基和培养条件两方面,以降解率为指标,采用单因素正交联用试验进行工艺优化。最终确定了培养基条件为蛋白胨5 g/L、葡萄糖25 g/L、胆固醇浓度1.0 g/L、胆盐浓度2.0 g/L;培养条件为培养温度37℃、pH值6、培养时间24 h、接种量1%,在此优化条件下胆固醇降解率达到69.81%。(3)小鼠体内试验研究。本论文构建了小鼠高脂模型,研究饲喂菌株HJ-S2对小鼠健康状况的改善情况。结果显示高脂模型组建模成功,菌液HJ-S2能明显降低小鼠血清总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDLC)含量及动脉粥样硬化指数(AI值),提高血清高密度脂蛋白(HDLC)含量、粪便含水量和饲料利用率;改善修复高脂小鼠腹部和肾周脂肪的堆积、肝脏和胰腺组织的损伤,且作用效果与灌胃浓度呈现正比关系,高剂量组(109 CFU/mL)作用效果最优,且与阳性对照组作用效果相当。表明菌株HJ-S2可以有效改善高脂小鼠健康状况从而降低小鼠患病风险。