蛋黄卵磷脂纯化工艺研究

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卵磷脂是目前应用十分广泛的乳化剂,高纯度的蛋黄卵磷脂更是医药行业不可缺少的物质。卵磷脂本身也具有一定的降血脂等保健作用,因此,针对卵磷脂生产的研究十分重要。目前国内生产的卵磷脂以大豆卵磷脂为主,且其纯度低,理化性质差,无法作为药品乳化剂使用,目前我国高纯度的蛋黄卵磷脂基本依赖进口,而进口产品的价格大大限制了我国药品在国际药品行业中的竞争力,因此,研究高纯度卵磷脂的制备方法,是我国亟待解决的难题。本文针对蛋黄卵磷脂的纯化工艺,主要做了以下几点工作1建立卵磷脂的检测方法,并对粗品卵磷脂进行了全成分分析。结果显示粗品中60%以上为磷脂类物质,其中磷脂酰胆碱占94.4794%,磷脂酰乙醇胺占2.4151%、鞘磷脂占0.7294%、溶血卵磷脂占2.358%。其余杂质为甘油酯类物质,甘油脂类物质也为一系列的混合物,本文对其一一进行了分析。2本文针对沉淀法提纯卵磷脂进行了研究,结果显示,有机溶剂法优于金属离子法,其中有机溶剂沉淀法提纯时,产品纯度由50%提升至65%,提高了15个百分点,回收率为71.8%。虽然此法回收率偏低,但是,此工艺验证了关于溶剂法提纯卵磷脂的想法,可以作为低纯度卵磷脂制备工艺的参考。3对树脂进行了筛选,得到了一种大孔非极性树脂D101,其可以利用除杂的原理,对卵磷脂进行提纯。最佳的纯化条件是以12:1的高径比装柱,上样浓度为3mg mL-1,上样流速为1.5BV h-1,上样3个柱体积后,进行洗脱,洗脱液为95%的乙醇-水溶液,洗脱柱体积为2.5个柱体积,最终产品的纯度为81.23%,回收率为89.28%。4将中低压制备色谱引入卵磷脂的纯化。经过系统研究,最终确定最佳流速为20mL·min-1,最佳进样浓度为0.2mg mL-1,最佳进样量为0.8g,最大进样量为1.0g。此实验纯度的重现性良好,经过液质联用与核磁谱图的确认,可知,此法可以稳定的得到平均纯度为98.16%卵磷脂,其平均回收率为96.82%。经过对干燥方法的探究,本实验确定了利用冷冻干燥法对高纯度卵磷脂进行干燥,其所得产品结构未发生改变,性状由原来的乳黄色固体变为白色固体。5第一次将HILIC柱引入到卵磷脂的分离工艺中,并探究出了一个环保、有效的流动相——纯乙醇。经过制备分离、液相质谱检测可以确定,此方法可以分离得到纯度在99%以上的磷脂酰胆碱。此法最大上样量为60mg,最终可得高纯度产品46.2mg。
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