气道上皮IL-25表达与哮喘气道重塑的相关性研究

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研究背景:支气管哮喘是由多种炎症细胞如嗜酸性粒细胞(EOS)、肥大细胞、T淋巴细胞等及多种细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病,并且通常以气道上皮的结构改变为病理特征。支气管哮喘的三个主要病理改变包括:气道炎症、气道重塑及平滑肌功能紊乱。气道重塑是支气管哮喘的主要特点,其主要的病理改变是:上皮功能与结构的改变;基底膜增厚;微血管重构;平滑肌增生与肥大;粘液腺与杯状细胞增生等,其核心环节是上皮功能与结构的改变。气道重塑的出现是肺功能受损的病理基础,可导致劳动力丧失,增加社会医疗负担。EOS与哮喘气道炎症反应密切相关,但与哮喘气道重塑的关系存在很大争议。白细胞介素-25(亦称IL-17E)是IL-17家族的成员之一,是由Fort等首先报导由活化的Th2型细胞分泌的一种细胞因子,其在启动、促进和调节Th2型免疫反应中起重要作用。研究发现气道上皮受损可使IL-25释放增加,进而在哮喘气道炎症和气道高反应中发挥作用,但其与哮喘患者气道重塑是否相关目前尚无系统研究。目的:通过检测白细胞介素-25(IL-25)在嗜酸细胞性哮喘(EA)及非嗜酸细胞性哮喘(NEA)患者的血清、诱导痰及气道上皮中的表达,探讨其在支气管哮喘气道重塑中的作用。方法:选取初治的支气管哮喘患者55例,健康对照组27例,所有受试者均进行肺通气功能检查,然后采集空腹静脉血及诱导痰。据诱导痰中嗜酸性粒细胞(EOS)的比例将哮喘患者分为EA组和NEA组。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunoadsordent assay, ELISA)检测血清及诱导痰中IL-25的水平,同时对其中的10例EA组患者、10例NEA组患者及10例健康对照者行电子支气管镜气道粘膜活检,免疫组织化学技术分析IL-25在气道上皮的表达,HE染色测量气道重塑的重要指标——基底膜厚度,并行血清及诱导痰中IL-25的水平与基底膜平均厚度的相关性分析。结果:1.受试者一般情况:根据诱导痰中嗜酸性粒细胞(EOS)所占的比例,EOS≥3%为嗜酸细胞性哮喘组,EOS<3%为非嗜酸细胞性哮喘组,其中嗜酸细胞性哮喘组26例,非嗜酸细胞性哮喘组24例,两者比例相当。两组间年龄、性别、肺功能水平无明显差异。与正常对照组相比,嗜酸细胞性哮喘组和非嗜酸细胞性哮喘组患者的肺功能轻度受损。2.诱导痰及外周血IL-25的表达情况:ELISA结果显示哮喘患者血清及诱导痰中IL-25的水平均明显高于对照组(p<0.05),而嗜酸细胞性哮喘组和非嗜酸细胞性哮喘组患者间差异无统计学意义(p>0.05)。且哮喘患者血清及诱导痰中IL-25的水平是平行增加的。3.免疫组化检测气道上皮内IL-25的表达水平:对照组可见IL-25表达较弱,支气管气道上皮仅见少量表达;嗜酸细胞性哮喘和非嗜酸细胞性哮喘患者可见气管气道上皮存在大量被染成褐色IL-25阳性免疫反应,表达明显强于对照组。4.HE染色观察肺组织病理学改变对照组气道上皮结构完整,粘膜下少量炎症细胞浸润,基底膜厚度相对较薄;嗜酸细胞性哮喘和非嗜酸细胞性哮喘患者气道上皮脱落,粘膜下大量炎性细胞浸润和腺体增生,气道粘膜下的基底膜厚度明显增加,与对照组相比,基底膜厚度差异有统计学意义(p<0.05)。5.重要相关性分析:相关性分析显示嗜酸细胞性哮喘患者血清中IL-25水平与气道粘膜下基底膜平均厚度成正相关,诱导痰中IL-25水平亦与基底膜平均厚度成正相关;非嗜酸细胞性哮喘患者血清中IL-25水平与气道粘膜下基底膜平均厚度成正相关,诱导痰中IL-25水平亦与基底膜平均厚度成正相关。结论:1.IL-25在哮喘患者外周血及诱导痰中的表达平行增加;2.IL-25在气道上皮内特异性表达增加,外周血及诱导痰中IL-25水平与上皮下基底膜厚度成正相关。IL-25可能有促进哮喘气道重塑的作用;3.基底膜增厚存在于嗜酸细胞性哮喘和非嗜酸细胞性哮喘中,EOS在哮喘气道重塑中的作用还有待于进一步研究。
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