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目的:β1,3 N—乙酰葡萄糖基转移酶(β3GnT8)是一个新型的人类糖基转移酶,属于β3糖基转移酶大家族。本文旨在研究其在胶质瘤细胞SHG44和U251内基因表达情况以及对其表达蛋白进行初步的细胞内定位。
方法:
1.半定量RT—PCR检测GnT8 mRNA水平的表达;
2.Western blot检测蛋白表达;
3.运用细胞免疫组化检测GnT8蛋白在两种细胞内的分布。
结果:
1.两种细胞均发现有β3GnT8的mRNA表达,其中SHG44表达量较低,而U251表达量较高;
2.Western blot印迹检测两种胶质瘤细胞均有该基因蛋白表达,其中SHG44表达量较低,U251表达量较高;
3.细胞免疫荧光染色显示GnT8表达蛋白在两种胶质瘤细胞内均主要分布于细胞核周围的胞浆中。
结论:β3GnT8在SHG44细胞种mRNA与蛋白表达水平均较低,在U251细胞中则较高,表达蛋白主要分布于核膜周围的胞浆中,提示其主要分布于与蛋白质合成加工密切相关且主要分布于近核膜一侧的高尔基体。