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[研究背景]黑色素瘤是一种高度恶性的皮肤肿瘤,具有发病年龄早、转移率高等特点,对各种化疗药物敏感性低。随着现代医学的发展,黑色素瘤的基因治疗成为目前研究的热点。Survivin是凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis,1AP)家族的新成员,是目前为止发现的最强的凋亡抑制因子。在正常成人组织中不表达,而特异性的表达于人类多种常见肿瘤中,具有抑制凋亡、调节细胞有丝分裂等作用。RNA干扰(RNA interference, RNAi)是利用小的双链RNA(double-stranded RNA, dsRNA)高效、特异地阻断体内目的基因表达,促使mRNA降解,从而达到基因沉默的过程。近年来,被广泛应用于肿瘤基因治疗的研究中。[目的]观察靶向survivin的RNAi对人恶性黑色素瘤A375细胞的影响。[方法]取对数生长期的人恶性黑色素瘤A375细胞,分为空白对照组(不转染)、阴性对照组(转染NC-GFP-LV)、阳性组(转染survivin-RNAi-LV),利用慢病毒载体进行转染,倒置荧光显微镜下观察转染效果。蛋白质印迹法检测survivin蛋白的表达,实时定量PCR检测survivin-mRNA的表达。[结果]成功设计并构建了survivin-siRNA慢病毒载体,转染72h后观察转染效率达80%以上,与空白对照组相比,转染survivin-siRNA的阳性组,survivin mRNA及蛋白的表达明显降低,抑制率分别为60%、87.38%,差异具有显著性(P<0.05)。与阴性对照组相比,阳性组,survivin mRNA及蛋白的表达明显降低,抑制率分别为59.75%、86.72%,差异具有显著性(P<0.05)。空白对照组与阴性对照组相比,差异不具有显著性(p>0.05)。[结论]靶向survivin的shRNA能够明显抑制恶性黑色素瘤A375细胞的survivin基因的表达。