【摘 要】
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目的本研究旨在探讨miR-126是否通过靶向GOLPH3调控PI3K/AKT/m TOR通路抑制胃癌侵袭及转移,为寻求胃癌新的治疗靶点奠定基础并提供新的理论依据。方法利用慢病毒转染SGC-7901,构建miR-126过表达、抑制表达细胞株及各组阴性对照细胞株,采用实时荧光定量PCR检测各组细胞株中miR-126的表达量;采用CCK-8、平板克隆实验检测miR-126对SGC-7901增殖能力的影响
【基金项目】
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项目名称:miR-126调控GOLPH3对胃癌侵袭、转移的影响及其机制研究,项目合同编号:S2019100,项目来源:广西医疗卫生适宜技术开发与推广应用项目,项目起止时间:2020.01-2022.12；
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目的本研究旨在探讨miR-126是否通过靶向GOLPH3调控PI3K/AKT/m TOR通路抑制胃癌侵袭及转移,为寻求胃癌新的治疗靶点奠定基础并提供新的理论依据。方法利用慢病毒转染SGC-7901,构建miR-126过表达、抑制表达细胞株及各组阴性对照细胞株,采用实时荧光定量PCR检测各组细胞株中miR-126的表达量;采用CCK-8、平板克隆实验检测miR-126对SGC-7901增殖能力的影响;采用划痕实验、Transwell实验检测miR-126对SGC-7901迁移及侵袭能力的影响;采用实时荧光定量PCR检测各组细胞中GOLPH3、PI3KR2、AKT、m TOR的m RNA表达水平,蛋白印迹分析实验检测各组细胞中GOLPH3、PI3KR2、AKT、p-AKT、m TOR、p-m TOR的蛋白表达水平。采用裸鼠皮下成瘤实验检测miR-126对SGC-7901成瘤能力的影响。结果利用SGC-7901成功构建miR-126过表达及抑制表达细胞株,以及各组阴性对照细胞株;过表达miR-126可抑制SGC-7901的增殖（P＜0.05）、迁移（P＜0.05）与侵袭（P＜0.05）能力;而抑制SGC-7901中miR-126的表达则会增强其细胞的生长（P＜0.05）、迁移（P＜0.05）及侵袭（P＜0.05）能力。过表达miR-126可同时下调SGC-7901中GOLPH3、PI3KR2、AKT、m TOR（P＜0.05）的m RNA及蛋白表达,以及p-AKT、p-m TOR（P＜0.05）的蛋白表达;抑制miR-126则可提高该组细胞内GOLPH3、PI3K、AKT、m-TOR（P＜0.05）的m RNA及蛋白表达,同时提高p-AKT、p-m TOR（P＜0.05）的蛋白表达。过表达miR-126能促进SGC-7901的成瘤能力,而抑制miR-126的表达则会抑制SGC-7901的成瘤能力。结论miR-126可在体外抑制胃癌细胞的增殖、迁移与侵袭,在体内抑制胃癌细胞的成瘤能力。该作用可能通过靶向GOLPH3调控PI3K/AKT/mTOR通路实现。
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