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乳腺癌是发生在乳腺上皮组织的恶性肿瘤,目前手术切除外加药物辅助治疗能够对原位瘤有很好的治疗效果,但是由于扩散的肿瘤细胞对现有的治疗手段有很强的耐受作用,因此转移性乳癌很难治愈。在高转移性乳腺癌细胞中,MYL9,MYH9,CYR61等一系列迁移相关基因的表达明显高于正常乳腺细胞和的低转移性乳腺癌细胞。一氧化氮(NO)是一种可以透过细胞膜的气体分子,可由一氧化氮合酶(NOS)催化产生。NO在细胞内与蛋白质半胱氨酸残基结合,使蛋白质被亚硝基化修饰,从而改变蛋白质构象和功能,在介导细胞信号转导以及细胞功能方面有着重要的作用。本论文的目的是研究一氧化氮对乳腺癌细胞生长、特别是迁移能力的影响并探索其分子机制。本文用硝普钠(SNP)做为NO的供体处理乳腺癌细胞MCF7和MDA-MB-231,通过检测细胞培养基总NO含量和细胞总蛋白硝基化水平验证了 SNP的有效性。通过划痕和Transwell实验检测细胞迁移能力,结果显示低浓度SNP促进MCF7迁移,抑制MDA-MB-231迁移;然后通过MTT和CCK8实验检测发现不同浓度SNP会不同程度抑制细胞增殖生长,也证明了迁移结果的准确性;另外,通过Annexin-V/PI双染法和Hoechst染色法探究不同浓度SNP对细胞凋亡的作用,实验结果表明高浓度SNP会促进细胞凋亡。为了探究SNP对细胞迁移的作用机制,运用RT-PCR及Western blot实验方法探究迁移标志基因表达的变化,结果表明低浓度SNP会促进MCF7迁移标志基因表达,因为MYL9,MYH9和CYR61均为MRTF-A的下游调控靶基因,所以推测SNP通过影响MRTF-A进而影响迁移标志基因;然后又通过干扰NOS2和NOS3阻断内源NO产生,实验结果显示抑制NO的合成可以抑制MRTF-A及其下游迁移标志基因表达。同时过表达和干扰MRTF-A检测对MCF7细胞迁移标志基因表达的影响,结果表明SNP可以增加MRTF-A表达进而促进迁移,为了验证SNP是否通过RhoA/ROCK通路影响MRTF-A进而影响迁移基因表达,结果显示加入Y27632(ROCK抑制剂)同时加入低浓度SNP抵消了 Y27632对迁移标志基因表达的抑制作用。综上所述,本研究结果表明NO可能通过影响细胞迁移相关基因表达而促进或抑制肿瘤细胞迁移。在肿瘤微环境中巨噬细胞和肿瘤细胞均可产生NO,所以,本研究结果有助于阐明乳腺癌转移的分子机制,为乳腺癌的治疗方法的研发提供理论依据。