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乳铁蛋白（Lf）是存在于初乳、乳清等中的一种天然活性糖蛋白，铁亲和能力强，具有广谱抗菌、抗病毒、抗癌、调节机体免疫力等多种生物学功能，是婴幼儿配方奶粉的重要成份。传统乳铁蛋白分离方法大都操作复杂、成本较高。因此，开发一种操作简单、成本低廉的分离方法是乳铁蛋白研究的重要课题之一。基于磁性纳米粒子的蛋白质分离技术是一种新型分离技术。本研究拟利用磁性纳米粒子进行乳铁蛋白分离，主要对磁性纳米颗粒的表面修饰和功能化进行了探讨，以牛血清蛋白（BSA）为模型蛋白对构建的磁性吸附剂的吸附性能进行了评价，并利用构建的吸附剂分离Lf，获得了一种分离快速、操作简便、产品纯度较高的乳铁蛋白分离方法。论文的主要结论如下：1.利用活性红120对壳聚糖修饰的磁性纳米粒子进行了表面功能化，构建了一种磁性亲和吸附剂。该吸附剂呈圆球形，尺寸10～100μm，表面较光滑；活性红120的连接量为19.99mg/g；等电点约pH6.5。2.以BSA为模型蛋白，对构建的磁性吸附剂的吸附性能进行了评价。结果表明，溶液pH、离子强度、BSA初始质量浓度、吸附时间对BSA吸附量有显著的影响；pH5.0时BSA吸附量最大；离子强度的增大导致BSA吸附量减小；经活性红120功能化的磁性壳聚糖微球对BSA的吸附量约为磁性壳聚糖微球的5倍；其吸附行为符合动力学准二级模型和Langmuir吸附等温模型；采用0.5mol/L的NaCl（pH8.0）作为洗脱剂，洗脱率为99.03%；经过5次吸附–脱附循环，磁性吸附剂对BSA的吸附量没有明显下降。3.利用构建的磁性壳聚糖亲和吸附剂分离水溶液和乳清中的Lf。结果表明，溶液pH、离子强度、Lf初始质量浓度、吸附时间对Lf吸附量有显著的影响；pH7.0时吸附量最大；离子强度的增大导致Lf吸附量减小；磁性吸附剂对Lf的吸附行为符合动力学准二级模型和Langmuir吸附等温模型；吸附剂对Lf的吸附速度快，60min即达到吸附平衡；吸附过程为吸热过程，且以物理吸附为主；采用1mol/L的NaCl（pH7.0）洗脱，洗脱率为92.4%；经过8次吸附–脱附循环，吸附剂对Lf吸附量无明显下降。利用该磁性亲和吸附剂分离乳清中的Lf，SDS－PAGE电泳结果表明，获得的Lf纯度达到90%以上，表明构建的磁性亲和吸附剂对乳清中Lf具有较好的选择性，回收率经估算为34.3%。基于该磁性吸附剂的分离方法可以作为乳清中Lf分离的一种有效方法。