【摘 要】
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目的:通过建立病毒性心肌炎细胞模型研究黄芪多糖体外抗CVB作用,旨在为临床治疗病毒性心肌炎的药物选择提供实验依据.方法:MTT染色分析黄芪多糖对病毒感染后的VERO细胞是否有
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目的:通过建立病毒性心肌炎细胞模型研究黄芪多糖体外抗CVB<,3>作用,旨在为临床治疗病毒性心肌炎的药物选择提供实验依据.方法:MTT染色分析黄芪多糖对病毒感染后的VERO细胞是否有保护作用;病毒繁殖抑制实验比较不同分组间TCID50的差别以验证黄芪多糖在VERO细胞上的抗病毒活性;采用差速贴壁法培养原代乳鼠心肌细胞,镜下观察心肌细胞搏动次数,使用HE染色和α-actin免疫组化法鉴定培养心肌细胞的纯度;以柯萨奇病毒B组3型(Nancy株)感染心肌细胞建立病毒性心肌炎细胞模型,于感染病毒1小时后加入不同浓度黄芪多糖,逐日观察心肌细胞搏动次数、细胞病变(CPE),MTT染色以比较各组间存活细胞数的差别;测定各实验组心肌细胞培养上清液中LDH、CK-MB的变化;药物在小鼠脾细胞上诱生干扰素,以VSV作为攻击病毒,在L929细胞上检查干扰素的产生动态变化.结果:经过在VERO细胞系水平的初筛,确定黄芪多糖具有保护细胞免受CVB<,3>病毒侵袭的作用.病毒繁殖抑制实验的结果为:黄芪多糖的高、中剂量组TCID50与病毒对照组TCID50相差一个以上对数值.在心肌细胞上进行的CPE抑制实验表明黄芪多糖确能保护CVB<,3>感染的心肌细胞(P<0.01)且能使心肌酶的释放较病毒组显著降低(P<0.01).黄芪多糖的高、中剂量组均能在体外诱生小鼠脾细胞产生干扰素.结论:通过建立病毒性心肌炎细胞模型,证实黄芪多糖在体外细胞培养物上具有显著的抗CVB<,3>作用,具有防治病毒性心肌炎的前景.
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