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肠道稳态是肠黏膜屏障、肠道内环境等相互作用所构成的动态平衡状态。肠粘膜包括机械屏障即肠黏膜上皮结构,包括了肠上皮细胞及肠上皮细胞间的连接等,具有吸收营养物质并将有害物质排除在屏障外的功能。肠粘膜受损时,伤口附近的肠上皮细胞会丧失极性,细胞表面的微绒毛也会消失,从而使屏障功能受损,内毒素和细菌容易侵入。为了修复肠粘膜,损伤周围的肠上皮细胞会迅速迁移,隐窝基底部的干细胞也会发生增殖分化对肠粘膜进行修复。大脑海绵状血管瘤(CCM)是一种以扩张微血管为主要特征的中枢神经系统疾病,CCM疾病相关的蛋白(KRIT1,CCM2,PDCD10)已经证明在内皮细胞及其外膜细胞连接和屏障功能有一定影响,三种蛋白的缺失都会破坏内皮细胞的功能。但CCM蛋白在上皮屏障功能中的作用尚不明确,因此,我们拟通过CCM基因敲除小鼠探讨CCM在肠上皮稳态中的作用和机制。方法:CCM基因敲除小鼠及对照组小鼠给予腹腔注射它莫昔芬(TAM)控制CCM蛋白特异性表达,连续注射两周,通过体重百分比、疾病活动度、结肠缩短程度、组织病理学等方面评估结肠粘膜损伤程度;HE和PAS染色观察肠上皮细胞形态;免疫荧光法检测钙粘蛋白等在上皮组织中的分布情况;免疫组化法检测肠上皮组织中溶菌酶等的表达与分布。结果:1.与对照组小鼠相比,PDCD10全身敲除小鼠和肠上皮特异性敲除小鼠在第5天时开始表现出更显著的体重下降;另外,肠上皮特异性敲除小鼠TAM诱导后结肠缩短更明显,肠组织病理表征明显,肠道通透性改变;2.与对照组小鼠相比,PDCD10肠上皮特异性基因敲除小鼠TAM诱导后肠组织E-Cadherin(上皮钙粘蛋白)表达降低,相对于对照组,实验组的E-cadherin蛋白分布从均匀分布变成了极性分布,聚集在基部一侧,肠上皮细胞极性发生改变,HE染色和PAS染色可见肠道绒毛细胞有融合现象,细胞极性发生改变;3.PDCD10上皮特异性敲除小鼠Alcian blue显示肠上皮杯状细胞减少,Lysozyme在隐窝减少,绒毛增加,对照组没有表达,显示潘氏细胞位置改变。ezrin(埃兹蛋白)和pNHE3表达增加,提示PDCD10肠上皮特异性敲除影响肠上皮细胞向上迁移;4.Ki67染色总隐窝细胞增多,ki67阳性细胞略有减少,阴性细胞增多,注射brdu两小时后,每个隐窝中brdu阳性细胞略有减少,Olfm4(类嗅素蛋白)表达增加。Cleaved caspase-3(裂解半胱天冬酶-3)只在绒毛中表达,相较于对照组,阳性细胞表达增多,提示肠上皮细胞增殖和凋亡受CCM缺失影响。结论:这些数据表明CCM可能通过多种不同的途径影响肠上皮稳态:细胞极化,细胞迁移和分化以及肠上皮细胞的增殖和凋亡。