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目的：既往研究发现，小鼠胚胎肝Lin-c-kit+造血干细胞在体外能分化为树突状细胞。其分化所需的培养条件除细胞因子GM-CSF+SCF+Flt3L+TNFα外，还需要有基质细胞PA6的存在。本研究拟探讨在没有基质细胞PA6存在的情况下，胚胎肝Lin-c-kit+造血于细胞能否在体外分化为树突状细胞，找出决定胚胎肝Lin-c-kit+造血干细胞向树突状细胞分化的关键因子，并进一步验证其在体内分化为树突状细胞的能力。
方法：采用FACS分离小鼠胚胎肝Lin-c-kit+造血干细胞，以IMDM培养基调整细胞密度为3×104/ml，在细胞因子组合GM-CSF+SCF+Flt3L的基础上，单独或联合加入细胞因子IL-3、IL-7、IL-15，培养12-14天后，继续用GM-CSF+TNFα刺激3-5天。观察细胞形态，收集细胞后荧光染色流式细胞仪分析表型，或在混合淋巴细胞反应中检测刺激异体CD4+T细胞增殖的能力。接着，分别将B6 Ly5.2小鼠胚胎肝或骨髓来源的Lin-c-kit+细胞经尾静脉输入致死剂量照射的B6 Ly5.1受鼠体内，建立造血重建的嵌合鼠模型。在特定的时间点观察胚胎肝Lin-c-kit+细胞在体内分化为树突状细胞的能力，比较其与骨髓细胞来源的树突状细胞在表型及功能上的异同；将中和型抗IL-3或抗IL-7抗体注射入受鼠腹腔，观察并比较不同因子对Linc-kit+造血干细胞体内分化为树突状细胞的影响。
结果：⑴在没有基质细胞PA6，仅存在GM-CSF+SCF+Flt3L+TNFα的条件下，IL-3能诱导胚胎肝Linc-kit+细胞分化为树突状细胞，这些树突状细胞在混合淋巴细胞反应中能刺激初始CD4+T细胞增殖。IL-7能提高IL-3诱导产生的树突状细胞数量，但IL-7或IL-15均不能诱导胚胎肝Linc-kit+细胞分化为树突状细胞。⑵胚胎肝Linc-kit+细胞输入致死剂量照射的受鼠后，能够分化为脾脏DC。这些DC高表达Ia、CD11c，同时表达中等水平的CD40、DEC205、Thy1.2、CD8a；同时发现，胚胎肝Linc-kit+细胞能够在体内分化为皮肤郎格罕氏细胞，这些细胞表达E-cadherin、Ia、DEC205和Thy1.2，但仅表达低水平的CD11c，且不表达CD8a。无论是脾脏还是皮肤的树突状细胞，均能有效刺激T细胞增殖。中和型抗IL-3抗体能抑制胚胎肝来源的Linc-kit+细胞向树突状细胞分化，而中和型抗IL-7抗体则不影响胚胎肝Linc-kit+细胞在体内向树突状细胞分化。
结论：①胚胎肝Linc-kit+造血干细胞在体外没有基质细胞的存在下能分化为功能性的树突状细胞。②胚胎肝Linc-kit+造血干细胞在体内能分化为树突状细胞。③IL-3是调控胚胎肝Linc-kit+造血干细胞在体内外分化为树突状细胞的关键细胞因子。