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宫颈癌是妇科肿瘤中仅次于乳腺癌的第二大杀手。1995年,国际癌症研究协会(IARC)认定人类乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)16型和18型具有高致癌性。进一步的研究表明,HPV持续感染是宫颈癌发生的必要起因,而且除了16型和18型,31、33、35、45、51、52、58和59型均具有高度致癌危险性。HPV不同型别的检出率存在地域差异,其中,我国尤其是东南部地区是HPV58型的高发地区之一,在某些地区的检出率甚至高于18型,仅次于16型。人乳头瘤病毒是一种双链环状DNA病毒,目前已鉴定出的亚型约有200种。它由6个早期蛋白(E1、E2、E4、E5、E6、E7)和两个晚期蛋白(L1、L2)构成,其中E1蛋白在整个HPV家族中是保守性最强的蛋白之一。E1蛋白是病毒DNA复制的启动蛋白,并能与E2蛋白共同作用影响宿主细胞生长周期。鉴于HPV58型在我国的高发病率以及人乳头瘤病毒E1蛋白的高保守性和重要功能,鉴定HPV58型E1蛋白的线性B细胞抗原表位对于研制相关疫苗和抗体药物并最终为宫颈癌的诊断与治疗提供新的方案具有重要作用。我们利用pET-28b原核表达载体实现了HPV58型E1蛋白N端和C端的表达、纯化,以N端和C端重组蛋白为抗原分别免疫三只雄性新西兰大白兔,获得抗血清。随后,我们采用了改良的生物合成肽法,使用pXXGST-1短肽表达载体合成了70条覆盖E1蛋白N端和C端的相互重叠9个氨基酸残基的18肽,利用制备的抗E1-N及E1-C抗血清进行免疫印迹鉴定。我们鉴定出HPV58型E1蛋白全部24个主要B细胞线性表位,包括5个优势表位(DETADDSGTDLIEFIDD SVQSTTQAEA, CTHRKRKIIELEDSGYGN, MSNISDVQGTTPEWIDRL, TVLQH SFNDDIFDLSEMI, EFNNPFPFDANGNPVYKI).本研究为后续HPV58型E1蛋白精细线性B细胞抗原表位作图奠定了基础,对于研制相关疫苗和抗体药物并最终为宫颈癌的诊断与治疗提供新的方案具有重要作用。