高产奶牛泌乳早期常处于能量负平衡状态,严重的能量负平衡导致体脂大量动员、使体内糖脂代谢平衡发生紊乱,进而引发酮病。胰岛素(INS)是调控糖、脂代谢的重要激素之一,在酮病的发病过程中起着重要作用。本研究通过奶牛分娩前后动态检查,旨在阐明酮病奶牛INS素敏感性状态以及β-羟丁酸(BHBA)和非酯化脂肪酸(NEFA)对肝脏和脂肪组织INS信号的影响。本实验选择32头待产荷斯坦奶牛,从产前1周至产后8周采集血样,检测酮体(KET)、NEFA、血糖(GLU)、胰岛素(INS)、INS敏感性指数(RQUICKI)等指标。以血浆KET含量10Mg/dL为标准,将实验牛分为酮病组(KET≥10Mg/dL)和非酮病组(KET<10Mg/dL)。分析2组奶牛以上各指标的变化情况以及RQUICKI与其余指标的相关性。结果表明：酮病奶牛的血浆KET、NEFA水平极显著高于非酮病奶牛的水平、而INS水平显著低于非酮病奶牛的水平；酮病奶牛RQUICKI于产前1周和产后4至8周显著低于非酮病奶牛的指数。对320份血样的相关性分析,发现RQUICK与NEFA(r=-0.383)、GLU(r=-0.220)、 INS (r=-0.167)都呈极显著负相关。体外实验采用不同浓度的BHBA (0.5.1.0.3.0,5.0mM/L)和NEFA (0.4,0.8,1.6mmol/L)处理荷斯坦奶牛肝脏和皮下脂肪组织,采用荧光定量PCR相对定量方法分别检测INS受体(InsR)和受体后信号通路关键因子IRS1、IRS2、85和GLUT4 mRNA相对表达量。结果显示高浓度BHBA和NEFA可显著降低IRS1、IRS2、GLUT4和InsR相对表达量,从而导致肝脏和脂肪组织对INS的敏感性降低,且对NEFA的作用效果更为敏感。结论,分娩前后酮病奶牛INS敏感性低于健康奶牛,其原因主要与高血浆NEFA有关。高浓度BHBA和高浓度NEFA可降低奶牛肝脏和脂肪组织对胰岛素的敏感性。