多花筋骨草黑胫病病原菌鉴定及其生物学特性

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多花筋骨草Ajuga multiflora Bunge系唇形科Lamiaceae筋骨草属Ajuga Bunge,因其花期长,株形美观,生长快,易栽培,极具观赏价值,在江南一带作为一种地被新秀广泛栽培。从2004年秋天起,在杭州各风景区种植的多花筋骨草大片死亡,经调查,引起多花筋骨草大片死亡的原因是一种由真菌引起的病害,该病害从多花筋骨草下部叶片的叶柄先发病,最初病斑为褐色水渍状,后沿叶柄向上扩展为害,逐渐变黑腐烂,最后整株枯萎死亡。该病害的典型症状是多花筋骨草茎基部变黑腐烂,因此将该病害命名为多花筋骨草黑胫病(Blackleg Disease of Ajuga multiflora)。采集了14份发病的多花筋骨草样本,用组织分离法进行分离,结果分离到同一种病原菌。将分离得到的菌株重接回到健康的多花筋骨草植株上,发病症状与田间自然发病症状相同,并且可再次分离到与接种体相同的病原菌;经形态学鉴定为多喙茎点霉Phoma multirostrata(Sutton,B.C,1980)。测定了多喙茎点霉菌株JGC24的核糖体DNA(rDNA)内转录间隔区ITS序列,菌株的rDNA ITS1-5.8S-ITS2全长为441bp。以Phyllosticta sp.为外群,选用Phoma属中与P. multirostrata形态相似的8株共8个种,用邻近连接法构建系统发育树,结果各菌株之间显示了极大的相似性,菌株JGC24的ITS序列与P. exigua、P. exiguavar exigua的相似度为100%。在所选内群的Phoma中与本研究菌株JGC24亲缘关系最远的是P. herbarum,遗传距离为0.0413。研究了多喙茎点霉菌株JGC24的生物学特性,该病原菌最适的生长温度范围是20~25℃;最适合生长的pH范围为6~9;光照对该病原菌的生长速率影响不明显;在供试的5种碳源中,果糖、葡萄糖比较适合该病原菌丝的生长;在供试的5种氮源中,酵母浸出粉最适合该病原菌菌丝的生长,而脲不利该病原菌丝的生长。在平板上测定了14种杀菌剂对病原菌株JGC24的菌丝生长的影响。结果表明:在供试的14种杀菌剂中,其中多菌灵、甲基托布津、世高、好力克、保鲜克、福星、阿米西达,对多喙茎点霉有强烈的抑制作用,抑菌效果达100%。在平板测定的基础上,温室盆栽测定了6种杀菌剂对该病害的防治效果,结果表明:福星、甲基托布津、施佳乐对该病的防效达100%。研究了寡雄腐霉Pythium oligandrum菌株RCul对该病害的防治效果。盆栽试验测定了寡雄腐霉P. oligandrum菌株RCul对多花筋骨草的防效,防治效果达70.14%,结果与1000倍液的多菌灵(Carbendazim)防效无显著性差异(P=0.05)。
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