P53在高氧致胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞KGFR表达变化中的作用研究

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目的探讨胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)角化细胞生长因子受体(KGFR)在高氧暴露过程中表达的变化及其与P53的关系。方法原代培养胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞,并随机分为对照组、高氧组和高氧+Pifithrin组。流式细胞仪检测细胞内ROS水平的变化;Real-timePCR检测KGFRmRNA的表达;WesternBlot检测细胞KGFR,P-P53(ser392)蛋白的表达。结果(1)随着高氧干预时间的延长,肺泡Ⅱ型上皮细胞ROS值逐渐升高[(165.86±5.290)~(920.86±2.896),(P<0.01)],8h时达极点;(2)与对照组比较,高氧1h时,胎鼠AECⅡKGFRmRNA的表达即明显下降,4h时表达继续下降。高氧1h和4h时,其表达量分别为对照组的0.89倍和0.45倍(P<0.01)。(3)Westernblot结果显示:与对照组比较,高氧4h时,胎鼠AECⅡKGFR蛋白的表达即明显下降,12h时达极点,以后下降趋势逐渐减弱。高氧4、8、12、24和48h时,其下降幅度分别为1.3、1.6、1.9、1.3和1.2倍(P<0.01)。高氧4、8和12h时,高氧组P-P53(ser392)蛋白的表达均明显高于同时间点对照组(P<0.01)。并且在4h时达到高峰,然后随时间的延长表达逐渐下降;与高氧组比较,高氧+Pifithrin组P-P53(ser392)蛋白的表达明显下降(P<0.01),KGFR蛋白的表达得以恢复(P<0.01)。结论高氧通过激活P53从而抑制AECⅡKGFR的表达。
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