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造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)是目前治愈很多血液系统恶性肿瘤、实体瘤等疾病的有效方法。单倍体相合移植解决了供者来源不足的问题,但是供受者间人类白细胞分化抗原(Human leukocyte antigen,HLA)的屏障所导致的植入失败、移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)仍是制约移植成功的主要因素。传统的清髓性预处理方案往往伴随明显的骨髓抑制、器官毒性、GVHD等并发症,限制了其应用范围。非清髓性造血干细胞移植(nonmyeloablative hematopoietic stem cell transplantation,NST)采用相对较轻的预处理方案,要求的移植条件、毒副作用、并发症发生率相对较低,为已有脏器损害或年老体弱的患者提供了治疗机会。然而非清髓性单倍体移植由于预处理强度低常导致植入失败,因此如何促进植入同时减少GVHD发生是非清髓性单倍体移植研究的主要课题之一。移植物排斥、GVHD、GVL/GVT都是由供受者T细胞介导的免疫反应,阿糖胞苷主要作用于S期的细胞,对于增殖期的同种异体反应细胞敏感,可以在一定程度上杀伤宿主反应T细胞。前期研究在正常小鼠非清髓骨髓移植条件下通过移植前输注供体细胞来主动诱导宿主同种异体反应,然后通过阿糖胞苷去除这种细胞的免疫活力诱导异体耐受,结果表明可以促进供体细胞植入,本实验进一步在白血病小鼠非清髓性单倍体骨髓移植模型上研究观察移植前、后输注供体细胞对促进植入和增强GVL的作用。以CB6F1雌性小鼠为受鼠,C57BL/6雄性小鼠为供鼠,受鼠均分为3个大组,2组在移植前4d经尾静脉分别注射小鼠红白血病细胞1×106个/只,1组注射1×105个/只,其中每组又均分为3个小组,在移植前3d经尾静脉分组输注供鼠脾细胞或骨髓细胞3×107个/只、相同体积的无菌注射用水,输注细胞后24h和48h分别通过腹腔注射阿糖胞苷0.015g/d,移植前1d予450cGy全身照射(TBI),移植当天输注供鼠混合骨髓细胞6×107/只,大剂量肿瘤负荷组移植后15天输注供体免疫细胞6×107个/只。监测受鼠白细胞及体重变化、Y染色体性别决定基因(SRY)以及外周血供鼠CD3+细胞嵌合状态,观察小鼠GVHD、疾病复发及生存情况。不同肿瘤负荷情况下,各组混合骨髓移植后供体细胞均获得植入,移植后30d、60d时外周血SRY基因PCR检测结果均阳性。低白血病细胞负荷与高白血病细胞负荷情况下,移植前输注供体脾细胞组初期嵌合率均较高,移植后30d分别为96.87%±1.16%、41.19%±12.16%,小鼠移植后平均生存期分别为79.57±3.61d、69.16±1.64d,优于相同条件下移植前输注供体骨髓细胞组及对照组(p<0.05)。高白血病细胞负荷条件下移植后SC+MT组.BM+MT组、MT组小鼠平均生存期分别为69.16±1.64d、67.83±1.74d、66.66±1.47d,经过移植后供体细胞输注,SC+MT+DLI组、BM+MT+DLI组.MT+DLI组小鼠平均生存期为88±1.13d、88.8±1.07d、78.2±7.82d,较未输注组生存期有所延长。移植前输注供体脾细胞可以在移植后早期提高供体细胞嵌合、促进造血干细胞植入,适当延长生存期,移植后早期行供体免疫淋巴细胞输注可以进一步改善治疗效果。