亚麻酸对高脂大鼠血脂影响及促进肝脏SR-BI表达机制研究

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背景:α-亚麻酸(α- linolenic acid,ALA)是n-3系多不饱和脂肪酸,α-亚麻酸为全顺式9,12,15—十八碳三烯酸(C,8,3 n-3),是体内更长链n-3系不饱和脂肪酸的前体,经脱饱和与碳链延长作用生成一系列代谢产物,其中最重要的为二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA),目前一般认为α-亚麻酸的作用是通过EPA和DHA的作用而发挥的。大量流行病和试验表明ALA可通过调节血脂而发挥抗动脉粥样硬化的作用,如降低血浆甘油三酯和总胆固醇,而对血浆HDL代谢的研究很少。本研究以雄性SD大鼠为研究对象,以含亚麻酸量高达56.1%的精制荠蓝油为受试物,观察亚麻酸对高脂大鼠血脂代谢的影响及探讨其调节HDL代谢的可能机制。第一部分亚麻酸调节大鼠血脂及对机体氧化损伤作用研究目的:观察亚麻酸对高脂大鼠血脂代谢及对机体氧化损伤的影响方法:将大鼠分为基础对照组、高脂对照组、鱼油组和低、中、高剂量亚麻酸组,在试验期间每周称大鼠体重。在第6周将大鼠处死,称量大鼠的肝脏重量。试剂盒测定大鼠肝脏和血浆中的胆固醇和甘油三酯以及大鼠肝脏和血浆的氧化抗氧化指标SOD、MDA、T-AOC、CAT;聚乙二醇20000 (PEG 20000)沉淀法测定高密度脂蛋白(HDL)及亚组份胆固醇(HDL2-C,HDL3-C)的组成;脂蛋白琼脂糖凝胶电泳观察HDL微粒的电泳位移;试剂盒测定大鼠肝脏的AST、ALT水平。结果:大鼠体重随试验的进行稳定增长,但各组没有显著性差异;高脂对照组、鱼油组和低、中、高剂量亚麻酸组肝脏重量和肝体比明显高于基础对照组。高脂对照组、鱼油组和低、中、高剂量亚麻酸组肝脏胆固醇和甘油三酯明显高于基础对照组,鱼油组和亚麻酸组有使肝脏胆固醇降低的趋势;鱼油组和亚麻酸组明显降低高脂饮食大鼠血浆胆固醇和甘油三酯的含量。基础饮食、高脂饮食、鱼油以及亚麻酸对血浆氧化损伤影响没有显著性差异,但是高脂饮食明显增加肝脏的氧化损伤,降低肝脏的抗氧化水平,鱼油和亚麻酸未对高脂饮食大鼠肝脏造成额外的损伤。高脂对照组的HDL含量和HDL3与HDL的比值(HDL3/HDL)明显低于基础对照组,鱼油组和亚麻酸组的HDL含量又低于高脂对照组,但是HDL3/HDL高于高脂对照组。亚麻酸使HDL微粒在琼脂糖凝胶上的电泳位移增加,HDL微粒趋于小型化。鱼油和亚麻酸明显降低高脂饮食导致的肝脏AST升高。结论:亚麻酸对高脂大鼠的血脂有明显调节作用,明显降低了高脂大鼠血浆甘油三酯、血浆总胆固醇和HDL-C水平,增加大鼠血浆HDL3/HDL比值,使HDL微粒趋于小型化。亚麻酸不增加高脂大鼠血浆和肝脏的氧化损伤。第二部分亚麻酸促进大鼠肝脏SR-BI表达机制研究目的:探讨亚麻酸促进大鼠肝脏SR-BI表达的可能机制。方法:将大鼠分为基础对照组、高脂对照组和高脂加低高剂量亚麻酸组、高脂加中剂量亚麻酸组、高脂加高剂量亚麻酸组、高脂加罗格列酮组和基础饲料加罗格列酮组。6周后,用RT-PCR和Westen blotting检测大鼠肝脏PPARγ、SR-BI的mRNA以及蛋白的表达,用RT-PCR检测大鼠肝脏PDZK1和apoAI的表达。结果:1、大鼠肝脏存在PPARγ的表达。亚麻酸适度增加而罗格列酮明显增加大鼠肝脏PPARγmRNA和蛋白表达。2、高脂饮食降低大鼠肝脏SR-BI的转录和蛋白表达,亚麻酸和罗格列酮明显促进大鼠肝脏SR-BI mRNA转录、但是亚麻酸明显增加大鼠肝脏SR-BI蛋白表达而罗格列酮仅少量增加SR-BI蛋白的表达。3.亚麻酸明显促进大鼠肝脏PDZK1 mRNA和apoAI mRNA的转录,而罗格列酮对它们没有影响。结论:亚麻酸(也可能与其代谢产物一起)通过作为PPARγ的配体而活化PPARγ,活化后的PPARγ上调SR-BI的表达从而促进HDL的代谢,促进胆固醇的逆转运过程。PDZK1也在亚麻酸上调SR-BI表达过程中发挥了调节作用。
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