黄芩中抗蕃茄晚疫病原菌有效成分的提取及其抑菌机理的研究

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本文以中草药黄芩为试验材料,以蕃茄晚疫病菌为供试菌,跟踪检测其抑菌活性,对黄芩中有效成分的提取及影响其抑菌效果的因素进行了研究。同时,从生化方面和超微结构分析了黄芩提取液的抑菌机理,结果如下:1.黄芩中有效成分的最佳提取工艺:提取溶剂为无水乙醇,料液比为1:45(m:v),在65℃下提取1h,提取2次。此时,抑菌圈直径为34.3mm,其最小抑菌浓度为15.7mg/mL。2.黄芩提取物抑菌效果的影响因素:酸性条件下抑菌效果比碱性条件下好。热处理、蔗糖浓度对黄芩提取物的抑菌活性影响不大。紫外照射6h后,黄芩提取物的抑菌活性受到明显影响。3.定性检测结果为:黄芩提取物中可能含有黄酮类、萜类、酚类、挥发油类化合物。4.通过扫描电镜和透射电镜观察,经黄芩提取液处理后,蕃茄晚疫病菌的菌体变形,质壁分离,严重者细胞壁破损,内容物大量渗出,菌体死亡。5.电导率法测定细胞膜的通透性,可能抑菌物质加入即将细胞膜破坏,导致电解质大量外渗,培养液的电导率升高。荧光标记法测定细胞膜的完整性,抑菌液浓度较大时,细胞膜的完整性受到破坏。高浓度的抑菌物质能够很大程度的破坏供试菌的细胞结构,致使大分子物质大量渗出。6.提取供试菌的DNA,通过荧光光谱进行分析,黄芩提取物中的有效成分和EB竞争方式与DNA结合,降低其活性,改变其构象。
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