SNARE蛋白介导了内膜系统中复杂的囊泡运输,实现了功能蛋白在胞内的动态转运。在植物细胞中,对SNARE蛋白的研究主要集中在Q-SNARE蛋白,有关R-SNARE蛋白在囊泡运输及其生理功能的研究报道相对较少。前人研究表明,植物细胞中生长素运输载体的动态转运调控了生长素在组织细胞中的流向和梯度分布。生长素运输载体在细胞质膜上的极性定位是通过胞吞和胞内循环运输来调控的,而这些转运是通过囊泡定向运输完成的。目前,有关生长素运输载体胞内转运调控的研究较多集中在上游调控蛋白,例如RabGTPase,ARF,ARF-GEF等。然而,SNARE蛋白如何参与生长素运输载体的胞内转运,尚不清楚。在本论文中,我们利用拟南芥为实验体系,研究了R-SNARE蛋白VAMP721和VAMP722介导的囊泡运输在生长素运输载体的极性定位和胞内转运中的作用。研究内容和结果如下:1、首先观察分析vamp721vamp722纯合双突变体中生长素极性运输缺陷相关的表型。结果发现,纯合双突变体幼苗的子叶发育异常,产生单个、三个、融合子叶;叶脉出现融合、紊乱,不规则,不连续完整等多种异常;根冠小柱细胞中淀粉粒排布方式紊乱;且vamp721vamp722突变体经NAA诱导的侧根形成受到严重抑制。通过DR5rev:3XVENUS-N7和DR5rev:GFP报告基因对生长素相关处理的响应,发现纯合双突变体中生长素的分布受到影响,表明VAMP721和VAMP722蛋白在生长素极性运输中起重要作用。此外,转录因子SCR,SHR和WOX5在纯合双突变体根组织中的表达模式均发生改变。结合前人已报道的生长素运输缺陷的表型,我们的结果暗示VAMP721和VAMP722介导的囊泡运输参与生长素的极性运输。2、研究VAMP721和VAMP722在生长素运输载体亚细胞定位和胞内转运中的作用。生长素输出载体PIN1、PIN2和输入载体AUX1在vamp721vamp722突变体中的异常亚细胞定位表明纯合双突变体中生长素分布的改变是由于生长素运输载体极性定位受到破坏而引起的。其次,光漂白荧光恢复（FRAP）和囊泡运输抑制剂BFA处理的结果表明,vamp721vamp722突变体影响PIN2-GFP到质膜的运输。此外,Wm和黑暗处理实验结果表明,纯合双突变体不影响PIN2-GFP到液泡的运输。我们的结果表明VAMP721和VAMP722介导了生长素运输载体例如PIN2蛋白从胞内到质膜的运输。3、VAMP721和VAMP722参与维持TGN的结构。细胞器荧光蛋白标记胞内定位显示YFP-RabA2a和SYP61-CFP标记的部分TGN在突变体根细胞中形成不同程度的聚集,而不影响高尔基体和前液泡体标记蛋白的形态,表明VAMP721和VAMP722参与维持TGN的形态。前期研究表明VAMP721和VAMP722定位于TGN,参与了质膜蛋白的分泌运输。因此,本研究表明vamp721vamp722突变体可能通过改变TGN的结构进而部分影响生长素运输载体从TGN到质膜的分选运输。综上所述,我们得出以下结论:（1）VAMP721和VAMP722蛋白参与生长素极性运输;（2）VAMP721和VAMP722标记的囊泡装载生长素运输载体货物蛋白;（3）VAMP721和VAMP722介导的囊泡转运参与PIN2到质膜的定向运输;（4）VAMP721和VAMP722可能通过维持部分TGN的结构,进而调控生长素运输载体从TGN到质膜的分选运输。