论文部分内容阅读
生物素-亲和素系统(Avidin-Biotin Binding System, ABBS)是一种目前已知最强的非共价键结合粘连系统,在组织工程中有助于促进细胞的粘附。本课题从体内、体外两个方面评价ABBS修饰纳米纤维[P (LLA-CL) (75:25)]构建组织工程神经的可行性。体外实验：通过观察ABBS对雪旺细胞(Schwann cells, SCs)的粘附、增殖、形态变化和基因表达的影响,评价ABBS应用于组织工程神经的可行性。结果证实ABBS能够在短时间内显著提高SCs在纳米纤维支架材料表面的粘附效率,对SCs的代谢和增殖并无明显不利影响,而且能够有效促进SCs分泌细胞外基质、增强SCs中S100、GDNF、BDNF、NGF、CNTF、PMP22的基因表达。体内试验：建立大鼠坐骨神经缺损模型,评价ABBS修饰纳米纤维负载SCs构建组织工程神经对大鼠周围神经缺损的修复效果。60只Wistar大鼠被随机平分为5组：A组自体神经修复组；B组神经缺损无修复对照组；C组P (LLA-CL)空白支架组；D组P (LLA-CL)细胞组；E组ABBS细胞组。术后2、3个月通过步态分析、神经电生理、腓肠肌湿重、肌肉横切面积、再生神经髓鞘数量及厚度进行修复效果评价。结果负载SCs的D组和E组比C组没有负载SCs的空白支架修复效果好(P<0.05), SCs爬满支架所需时间E组显著短于D组(30min vs 24hr),但两组对坐骨神经的修复效果没有显著性差异(P>0.05)。结论：ABBS能够显著提高SCs在纳米纤维支架材料表面的粘附效率和速度,在短时间内使SCs爬满支架材料,并能增强SCs中S-100、GDNF、BDNF、NGF、CNTF、PMP22的基因表达,促进SCs分泌细胞外基质,体内应用无不良反应,可用于组织工程神经的构建,为将来ABBS抗体系统筛选、粘附优良种子细胞构建组织工程神经奠定基础。