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淫羊蕾(Epimedii)是我国著名的药用植物之一,其主要活性成分为黄酮类化合物。朝藿定F(epimedin F)属于8-异戊烯基取代黄酮苷,目前有关朝藿定F提取、活性筛选及其开发利用的报道极少。本文建立同时测定淫羊藿中朝藿定F、C和淫羊藿苷含量的高效液相色谱方法(HPLC);运用响应面法优化了淫羊藿中朝藿定F的微波-超声波协同提取工艺,利用扫描电子显微镜和透射电子显微镜技术探讨了提取机理;并在此基础上,考察了朝藿定F的体外降血糖、抗氧化、延长果蝇寿命、抑制乙酰胆碱酯酶活性、保护海马神经元等活性。淫羊藿中朝藿定F的最佳微波-超声波协同提取工艺为:乙醇浓度70%,提取时间20 min,液固比20:1(mL/g),微波功率200 W。微波-超声波协同提取法的提取率显著高于微波提取法和超声波提取法。通过电子显微镜观察发现,微波-超声波协同处理可使淫羊藿组织、细胞和部分细胞器出现破损,有助于提取溶剂与朝藿定F之间的传质,从而加速了朝藿定F的溶出,提高了提取率。朝藿定F对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶均具有一定的抑制作用,朝藿定F对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的 IC50 分别为 66.89 μg/mL 和 4.3 mg/mL。利用超声波提取法制备样品,建立了同时测定朝藿定F、朝藿定C和淫羊藿苷的高效液相色谱方法,色谱条件为色谱柱:ZORBAXSB-C8,5 μm,4.6×250 mm;柱温:25℃;流动相:A为乙腈,B为1.4%的乙酸溶液;乙腈的浓度梯度为:0～18 min(25%A),18～40 min(25%～48%A),40～42 min(48%～25%A),42～60 min(25%A);洗脱时间:60min;进样体积:10 μ L;流速1 mL/min,并对该方法进行了方法学考察,结果表明该方法简便、快速、准确,重复性好。考察了朝藿定F的抗氧化活性,首先以体外抗氧化实验为主,通过考察朝藿定F的总还原力以及对DPPH·、ABTS·+、· OH和O2-·的清除能力来评价朝藿定F的体外抗氧化性。结果显示,朝藿定F在实验浓度范围内,具有一定的抗氧化性并存在剂量依赖性。相比阳性对照Vc,抗氧化性比较弱,相比淫羊藿苷,其抗氧化性较强。以果蝇为实验对象,研究朝藿定F对果蝇寿命的影响以及对果蝇体内MDA含量和SOD、CAT、GSH-Px活力的影响,结果显示,0.01%剂量组的朝藿定F能延长雌雄果蝇平均寿命的23.60%和29.55%,使得果蝇体内SOD、CAT、GSH-Px的活力显著性升高(P<0.01),MDA的含量显著性降低(P<0.01)。考察朝藿定F对乙酰胆碱酯酶的抑制作用,其抑制率的IC50为0.988mg/mL。以皮质酮损伤的原代培养海马神经元为模型(实验得出皮质酮的最佳作用浓度为560 μM,作用时间为24 h),考察朝藿定F对皮质酮所损伤的海马神经元的保护作用,实验结果显示,2×10-2～2×10-4mM浓度范围内的朝藿定F对皮质酮损伤的海马神经元具有保护作用,且浓度范围内的朝藿定F本身对海马神经细胞没有毒性。