BJ对Wistar大鼠肠道菌群、肠道屏障及肝功能的影响

来源 :哈尔滨商业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cynthializzu
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中国饮食文化源远流长,饮食文化中的酒文化更是历久不衰,主要的原因是,在中国通过饮酒既能加强人际关系的交往,又能寄托情感,满足人们的饮用需求。其中,中国白酒扮演着重要的角色。由于当今人们物质生活水平的提高,对酒类的需求处于不断递增的状态,而饮酒所带来的问题也逐渐显现出来。为了能够满足人们的需求而又不影响健康的基础上,企业开发了一种具有保健功能的白酒BJ。BJ是一种液体制剂,主要成分是水和乙醇,此外还含有了酸、酯、酚、芳香族化合物及许多微量元素等。现有的对中国白酒的保健功能评价研究,大多数从药理学角度评价,包括其抗氧化、清除活性氧自由基、抗肿瘤、阻断致癌物的形成和抑制机体内的代谢转化等功能,但是缺乏对其肠道微生态影响的评价。本文对BJ进行了肠道微生态评价,分析其在适量饮用情况下对雄性Wistar大鼠肠道菌群微生态、肠道屏障功能、肠道内毒素(LPS)和肝功能的影响。  根据预实验结果,将40只Wistar大鼠随机分为4组:分别为正常组(2.8mL/kg)、低剂量1组(2.8mL/kg)、低剂量2组(1.4mL/kg)和阳性对照组(乙醇组(2.8mL/kg)),每组10只Wistar大鼠,灌服剂量为2mL/次/只,一日一次,连续60天,正常组灌服生理盐水剂量方法同上;两个月后处死所有大鼠,收集样本进行检测。  以Wistar大鼠为研究对象,采用变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)法和16S r DNA高通量测序检测BJ对肠道菌群的变化;HE染色观察BJ对结肠组织形态学的变化;RT-qPCR法检测ZO-1和Occludin-1在mRNA水平的改变;酶联免疫法(ELISA)检测血清及结肠中内毒素(LPS)的影响以此说明BJ对肠道屏障通透性的影响;HE染色观察BJ对肝脏组织形态学的变化;酶联免疫法(ELISA)检测肝脏中炎症细胞因子白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)含量的影响;紫外吸收法检测血清及肝脏中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量的影响以此反应BJ对肝功能的影响。  结果表明:PCR-DGGE结果显示:乙醇组的菌种数量和菌群多样性明显低于其余三组相比,正常组与低1组和低2组聚为了一类,说明正常组与低1组和低2组菌群相似度较高;16S r DNA高通量测序结果表明乙醇组与正常组相比,乳杆菌(科、属)(三actobacillales)、脱硫弧菌(目、科、属)(Desulfovibrio)、普雷沃菌属(Prevotellace ae_Ga6A1_group)、红蝽菌(目、属)(Coriobacteriaceae)等有益菌明显减少,Rumi nclostridium、Acidaminococcaceae,Selenomonadales等细菌明显增加。低1组与乙醇组相比,乳杆菌(Lactobacillales)、脱硫弧菌(Desulfovibrio)、疣微菌门(Verrucom icro bia)、双歧杆菌属(Bifidobacterlum)、梭菌科(Clostridiaceae)等有益菌明显增加,弯曲菌目(Campylobacterales)、Acidaminococcaceae、Ruminclostridium等致病菌明显减少。  正常组结肠组织腺体排列整齐,隐窝完整,低剂量1组结肠组织腺体排列完整,肠壁增厚,低剂量2组结肠组织隐窝缺损明显,乙醇组结肠组织腺体结构紊乱,粘膜糜烂、出血;RT-qPCR结果显示,ZO-1和Occludin-1的mRNA水平乙醇组明显低于其余三组,且存在统计学差异(P<0.05);血清中内毒素(LPS)含量各组之间无明显变化,结肠中LPS含量乙醇组与低剂量1和低剂量2相比明显升高,且存在统计学差异(P<0.05)。  正常组肝细胞正常无病变,无炎细胞浸润,低剂量1组肝细胞有少部分变性,无病变,低剂量2组肝细胞变性,有的胞浆出现大小不等的脂肪空泡,乙醇组肝细胞出现坏死,出现大部分较大的空泡;肝脏中白介素-6(IL-6)含量乙醇组明显高于其余三组,且存在统计学差异(P<0.05),白介素-10(IL-10)含量明显低于其余三组,且存在统计学差异(P<0.05);血清中谷丙转氨酶(ALT)含量乙醇组与其余三组相比存在上升趋势,且与低剂量2组相比存在统计学差异(P<0.05),肝脏中ALT含量乙醇组与其余三组相比明显升高,且存在统计学差异(P<0.05);血清中谷草转氨酶(AST)含量乙醇组与其余三组相比明显升高,且存在统计学差异(P<0.05);AST含量肝脏中与其余三组相比存在上升趋势,且与正常组和低剂量1组相比存在统计学差异(P<0.05)。  综上所述:低剂量1组与正常组肠道菌群结构较为一致,同时与乙醇组相比低剂量1组能增加肠道菌群的多样性,说明BJ对Wistar大鼠的肠道菌群有一定的调节作用;低剂量1组与乙醇组相比对大鼠结肠组织腺体结构无明显影响,并且能增加紧密连接蛋白(Occludin-1、ZO-1)的含量,降低肝脏中LPS含量,说明BJ可以降低肠道屏障的通透性,对肠道屏障有一定的保护作用;低剂量1组与乙醇组相比对肝脏组织损伤较轻,且肝脏组织结构基本完整,并且能降低肝脏中IL-6的含量,增加肝脏中IL-10的含量,说明BJ对肝脏有一定的保护作用,并且能减少炎症反应的发生。
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