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1研究目的应用化学致癌剂二甲基苯蒽(7,12-Dimethylbenzanthracene,DMBA)建立SD大鼠乳腺癌癌前病变(Precancerous Breast Lesion,PBL)动物模型,观察中药制剂消核颗粒(Xiao He Granule,XHG)对PBL的作用效果,初步探讨XHG防治PBL的作用机制。2研究方法雌性未育SD大鼠60只,对其中48只大鼠进行初始一次性胃管灌服DMBA(10mg/100g体重)、高脂饲料喂养9周建立大鼠PBL动物模型,空白对照组(Normal Control,NC组)12只大鼠予以灌服等量芝麻油。48只经过造模的SD大鼠随机分为模型对照组(Model Control,MC组)、三苯氧胺组(Tamoxifen Control,TC组)、消核颗粒低剂量组(XHLC组)、消核颗粒高剂量组(XHHC组)各12只,各组自第10周起按预定剂量药物干预治疗45天。采用组织病理学方法、免疫组化法(Immunohistochemistry,IHC)、数字图像分析系统(Digital Image Processing System,DIPS)等,观察各组大鼠一般情况、进食量、体重变化、肉眼可见肿瘤情况、乳腺组织病理学改变、测定乳腺组织血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2/Flk-1)及碱性成纤维细胞生长因子(FGF-2)的表达情况,并对结果进行统计分析。3研究结果3.1 XHG对PBL大鼠一般情况的影响实验观察发现,经DMBA造模后的大鼠在食欲、情绪等一般情况方面有所改变,MC组大鼠在进食量方面小于NC组、TAM及XHG药物干预组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。NC组大鼠未发现体表可触及肿瘤,MC组出现可见肿瘤的大鼠数量及出现肉眼可见的肿瘤数量明显高于XHHC组,差异具有统计学意义(均P<0.05),而与XHLC组及TC组比较无明显差异(P>0.05)。而各组大鼠在治疗前后体重未有明显差异(P>0.05)。3.2 XHG对PBL大鼠病理形态的影响光学显微镜下观察各组大鼠乳腺组织病理形态发现:大鼠经DMBA造模后,MC组的组织表现以中重度非典型增生(Atypical Hyperplasis,AH)的病理形态特征为主,说明DMBA能较好的建立大鼠PBL病理模型。TC组、XHLC组及XHHC组的表现均以普通一般性增生(Usual Ductal Hyperplasis,UDH)和轻度AH的病理形态特征为主,与MC组比较有显著性差异(P<0.01),表明XHG和TAM能抑制和逆转PBL的发生和发展,而且XHLC组及XHHC组的改善效果和TC组比较无显著差异(P>0.05),说明XHG对PBL治疗效果显著,与TAM的治疗效果近似。3.3 XHG对PBL大鼠乳腺组织Flk-1及FGF-2表达的影响IHC检测Flk-1、FGF-2的结果显示:Flk-1及FGF-2在NC组未见表达,MC组大鼠乳腺组织中Flk-1及FGF-2的表达阳性率最高,与NC组比较具有显著性差异(P<0.001)。药物治疗组中XHLC组最高,XHHC组次之,TC组最低,XHLC组及XHHC组均能减少Flk-1及FGF-2的阳性面积,皆可降低Flk-1与FGF-2的平均光密度(Optical Density,OD)值,与MC组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。根据XHLC组及XHHC组的对比存在差异性(P<0.05),说明XHG治疗PBL动物模型存在量效关系,XHHC组效果优于XHLC组,和TC组比较无显著差异(P>0.05)。说明XHG和TAM干预PBL皆存在一定的积极作用,对降低PBL模型大鼠乳腺组织Flk-1及FGF-2的表达有良好的作用,降低FGF-2的表达进而抑制血管生成可能是XHG干预PBL的主要机制。4研究结论4.1 XHG可改善PBL模型大鼠食欲不佳的情况,增加其进食量;控制其肉眼可见肿瘤的发生,对大鼠PBL的症状有改善作用。4.2 XHG能够改变PBL模型大鼠乳腺组织病理增生形态,可抑制和逆转大鼠PBL的发生和发展,对PBL有明显的改善作用,其治疗PBL效果与TAM类似。4.3 XHG具有阻断和逆转大鼠PBL的作用,其可能的机制是通过调节降低Flk-1及FGF-2的表达而抑制血管生成,其中下调FGF-2的表达可能是其抑制血管生成的主要途径。