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热疗是与先天免疫和适应性免疫反应调节相关的医学手段,可以刺激稳态趋化因子、整联蛋白、黏附因子以及细胞因子IFN-γ、IL-2等的表达。在对宫颈癌的治疗中增加热疗也会刺激细胞因子的分泌,诱导强烈的全身性抗HPV免疫反应,但人们目前对热疗促进细胞因子表达的机制的了解还有不足。cGAS是近年来发现的一种胞质DNA识别分子,感受到胞质中的异常DNA后会激活细胞的cGAS-STING通路,产生I型IFN反应,是细胞先天免疫的重要组成部分。HPV作为双链DNA病毒,感染细胞后会被细胞内及细胞间的多种免疫机制清除。相应地,HPV也进化出多重机制逃避宿主的免疫反应,完成持续感染的病毒便是在一定程度上逃避了先天免疫反应和适应性免疫反应的作用。为探究热疗对cGAS表达的影响,本研究选取HPV18阳性宫颈癌细胞He La和HPV16阳性宫颈癌细胞Si Ha为研究对象,建立了加热处理细胞的模型,用以研究宫颈癌细胞对热疗的短期应答和循环热处理后的细胞反应。通过q RT-PCR检测42℃加热培养后宫颈癌细胞内cGAS的转录水平,同时检测另一核酸识别分子RIG-1的表达。结果显示42℃培养60 min后cGAS的m RNA水平达到对照组的2倍以上,2次循环热处理后细胞cGAS的表达量显著升高,而42℃培养对RIG-1的促进效果并不明显。HPV E6和E7蛋白对病毒完成免疫逃逸至关重要,因此实验中对二者的表达进行了检测,结果发现在42℃短期能够显著改变He La和Si Ha细胞的HPV E6和E7的表达,其中处理90 min可使HPV16和HPV18的E6和E7的表达受到完全抑制。为探讨热应激导致的cGAS表达的升高是否与组蛋白修饰相关,研究中对2种热处理方式后细胞的组蛋白乙酰转移酶EP300和GCN5的表达进行了q RT-PCR分析,结果发现在42℃连续培养30 min后EP300和GCN5的表达量显著上升,且都在120-180 min后维持较高水平的表达;循环热处理后,细胞EP300和GCN5的表达量模式与cGAS类似,呈波动式上升,且在第2天达到最大值。可见热疗能够刺激表观遗传修饰关键酶的转录水平。本研究首次发现了热疗可促进I型IFN反应关键分子cGAS的表达,而且HPV关键致癌蛋白E6和E7的表达几乎可被热疗完全抑制,这有助于宿主先天免疫功能的恢复。鉴于HPV对宿主细胞乙酰化的抑制,热疗后EP300和GCN5表达量的升高对于机体免疫能力及宫颈癌的治疗都有积极意义。