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目的：运用茎环引物的SYBR Green I实时荧光定量PCR检测miR-199a-3p在结肠癌组织和细胞系中的表达情况并分析其表达与临床病理特征之间的关系，探讨miR-199a-3p与结肠癌发生和发展的关系。通过阻遏miR-199a-3p在结肠癌细胞系中的表达并检测分析miR-199a-3p对结肠癌细胞的增殖和凋亡的影响，为结肠癌的基因治疗提供理论和实验依据。方法：1.选取2004年4月至2008年6月，苏州大学附属第一医院普外科行手术的术前未行化疗和放疗结肠癌患者92例。采用实时荧光定量PCR检测92例结肠癌及其正常结肠组织中miR-199a-3p的表达，分析miR-199a-3p表达与年龄、性别、肿瘤位置、肿瘤大小、分化程度、淋巴管侵袭、血管侵袭、TNM分期、淋巴结转移、肝转移、腹膜转移等临床病理特征的关系。2.应用实时荧光定量PCR检测miR-199a-3p在五种结肠癌细胞株HCT-116、SW480、HT-29、Caco-2和Lovo中的表达情况，筛选出其中miR-199a-3p表达相对较高的一株结肠癌细胞。3.将Lipofectamine2000与FAM标记的阴性对照链(FAM-NC-inhibitor)按照不同比例混合后分组对miR-199a-3p表达相对较高的一株结肠癌细胞进行转染。通过流式细胞术检测各种不同混合比例的转染效率，确定最佳转染条件。4.通过实时荧光定量PCR验证miR-199a-3p inhibitor对该细胞中的miR-199a-3p表达的抑制情况。5.采用MTT法检测转染后不同时间点各实验组细胞的增殖情况，并绘制各实验组的生长曲线。运用流式细胞术检测转染后48h各实验组细胞的凋亡以及细胞周期。结果：1.miR-199a-3p在癌组织中的表达高于非肿瘤组织，两者有显著差异性(P<0.05)。miR-199a-3p的表达与结肠癌的淋巴管侵袭、淋巴结转移、肝转移及TNM分期相关(P<0.05)，miR-199a-3p的表达与肿块位置、年龄、性别、肿瘤大小、病理分级、血管侵袭、腹膜转移等其他临床病理因素之间未见显著相关性(P>0.05)。2.miR-199a-3p在五种结肠癌细胞株HCT-116、SW480、HT-29、Caco-2和Lovo中均有表达，其中在SW480中的表达相对较高。3.经过实验比较，本次实验最佳转染效率为98.0%。miR-199a-3p inhibitor阻遏组SW480细胞的miR-199a-3p表达明显下调(P<0.05)。4.与空白对照组和阴性对照组（NC-inhibitor组）相比，miR-199a-3p inhibitor阻遏组SW480细胞的增殖速度明显降低；转染后48h流式细胞术检测各实验组细胞凋亡率结果显示，空白对照组、NC-inhibitor组和miR-199a-3p inhibitor阻遏组的凋亡率依次为7.62±3.43%，9.06±2.12%，17.64±2.58%，其中miR-199a-3p inhibitor阻遏组凋亡率明显高于另外两组，同时细胞周期检测miR-199a-3p inhibitor组细胞大部分滞留在G0/G1期，差别有统计学意义(P<0.05)。结论：miR-199a-3p在结肠癌组织中的表达显著高于正常结肠组织。miR-199a-3p表达水平与结肠癌的淋巴管侵袭、淋巴结转移、肝转移及TNM分期相关。下调miR-199a-3p表达水平后，SW480细胞增殖活力明显下降，凋亡显著增加，细胞周期被阻滞在G0/G1期。提示miR-199a-3p在结肠癌中的异常表达可能在结肠癌的发生和发展过程中发挥重要作用，有望成为结肠癌新的预后指标及治疗靶点。