目的:研究胰高血糖素肽-1受体激动药(Exendin-4)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞增殖的影响并探讨Exendin-4发挥预防心肌纤维化作用可能的发生机制。方法:1.将0.1%Ⅱ型胶原蛋白酶作用于出生三天内SD大鼠的乳鼠心脏并采用差速贴壁法分离出原代心肌成纤维细胞,稳定后传代培养,本研究使用第二代至第五代心肌成纤维细胞;2.采用免疫荧光鉴定技术对上述方法分离出的原代心肌成纤维细胞进行纯度鉴定;3.利用四唑盐法(CCK8试剂盒)检测预处理Exendin-4对Ang Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖的影响,将培养的心肌成纤维细胞随机分为空白组、Ang Ⅱ组、Ang Ⅱ+(1×10-9,5×10-9,1×10-8)mol·L-1Exendin-4 组;4.将培养的心肌成纤维细胞随机分为空白组、Ang Ⅱ组、Ang Ⅱ+Exendin-4组、Ang Ⅱ+洛沙坦组、Ang Ⅱ+U0126组、Ang Ⅱ+SP6001 25组并利用蛋白免疫印迹实验检测心肌成纤维细胞中ERK、AKT、JNK、TGF-β1及Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)的蛋白表达并进行数据分析;5.通过细胞划痕实验测定Exendin-4对Ang Ⅱ引发的心肌成纤维细胞迁移的预防作用。结果:1.免疫荧光鉴定结果显示通过上述方法从乳鼠中分离出的心肌成纤维细胞纯度大于95%;2.CCK8实验结果显示Ang Ⅱ组在1 ×10-7 mol·L-1浓度下与空白组比较具有显著差异,且在一定浓度范围内预处理Exendin-4能明显抑制Ang Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖且具有剂量依赖性(均P<0.01);3.蛋白免疫印迹实验表明预处理Exendin-4能下调由Ang Ⅱ诱导的Collagen Ⅰ及TGF-βl的蛋白表达增加(P<0.05或P<0.01),预处理Exendin-4抑制由Ang Ⅱ诱导的磷酸化ERK、AKT蛋白表达增加(P<0.05)但对磷酸化JNK蛋白表达无影响;4.细胞划痕实验表明预处理Exendin-4对Ang Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞迁移有显著抑制作用(P<0.05)。结论:Exendin-4可能通过下调TGF-β1及磷酸化ERK、AKT蛋白表达,来抑制Collagen Ⅰ的形成从而抑制心肌成纤维细胞的增殖和迁移。这些实验结果表明Exendin-4对预防心肌纤维化起着一定的药理作用,为心肌纤维化的预防与治疗提供一些理论凭证。