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脑胶质瘤是最常见的颅内肿瘤,由于其呈浸润性生长的特点,临床上很难通过手术做到对肿瘤的彻底切除,因此手术后的放、化疗成为延长患者生存时间的重要方式。替莫唑胺(temozolomide,TMZ)由于其能迅速透过血脑屏障,并且生物利用度接近100%等特点,成为目前治疗脑胶质瘤疗效最好的一线药物,但是胶质瘤细胞对替莫唑胺具有原发或继发性耐药作用,严重阻碍了治疗效果,限制了它的临床应用。恶性肿瘤病人的抑郁症发病率明显高于普通人群,抗抑郁治疗是重要的肿瘤辅助治疗手段。氟西汀(Fluoxetine,FLT)属于选择性5-羟色胺再摄取的抑制剂(SSRI),被广泛应用于癌症患者的抑郁症状,同时研究证明氟西汀不仅能改善抑郁症状,还能镇痛、抗炎、提高患者免疫力,同时具有潜在的抗癌活性。本研究旨在:(1)探讨FLT对脑胶质瘤C6细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用及机制;(2)进一步观察FLT与TMZ联合给药对C6细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用;(3)为抗抑郁药FLT的辅助肿瘤治疗提供细胞分子生物学理论基础。方法采用CCK8法检测不同浓度FLT与TMZ单独或者联合给药时对多种脑胶质瘤细胞增殖的影响,运用流式细胞仪、caspase活性检测试验观察对细胞的凋亡作用。采用实时定量PCR技术与蛋白印迹法检测内质网应激诱导凋亡途径中相关蛋白的表达。利用CompuSyn软件评价FLT与TMZ的联合作用。结果FLT可以显著性地抑制多种脑肿瘤细胞并且呈剂量依赖性,大鼠脑胶质瘤细胞C6对FLT最为敏感,因此选择C6细胞做进一步的机制研究。FLT可以诱导C6,表现出核固缩等典型的凋亡形态学特征,流式细胞仪检测出FLT可诱导C6细胞的早期凋亡,Caspase 3的活性亦明显增加,但是线粒体膜电位(MMP)没有明显的变化。表明FLT对C6细胞的凋亡诱导作用可能依赖于一条非线粒体依赖的凋亡通路。进一步的研究发现FLT可以激活内质网应激标志分子-CHOP高表达,PERK-eIF2α-ATF4通路与ATF6通路参与了CHOP的激活过程。同时CHOP下游通路上的GADD34蛋白分子的表达亦增加。FLT与TMZ联合给药时对C6细胞产生明显的细胞毒性并且表现出协同作用(CI<1),同时对CHOP的激活也明显强于单一给药,而CHOP基因沉默后,FLT与TMZ的协同作用消失,揭示了FLT与TMZ对脑胶质瘤的联合作用是通过CHOP依赖的凋亡途径。结论FLT能明显的抑制脑胶质瘤C6细胞的增殖,通过激活CHOP依赖的内质网应激凋亡途径诱导C6细胞凋亡;FLT与TMZ联合给药的协同作用亦依赖于CHOP通路的激活;本研究为神经胶质瘤患者提供了FLT与TMZ联合给药的实验和理论基础。