近年来，许多农业公司利用包括转基因技术在内的现代生物技术开发新的植物品系。由于转基因植物存在的安全性问题使得转基因农作物的标签问题成为公众关注的主要热点，已有30多个国家制定了相应的法律法规对转基因作物及其衍生产品进行标签。目前，许多未经标签和认证的转基因大豆(GM Roundup-Ready soybean)已经进入中国市场，这就迫切地需要合适的检测手段以确定这些食品中是否含有转基因成分。 转基因产品含有由外源基因编码的传统品系不具备的特性，外源基因通常会在植物体内表达产生带有期望特性的蛋白。因此，来源于转基因农作物的原材料(如谷粒)和深加工产品(如食品)可以通过对外源基因或其表达产生的外源蛋白的存在与否进行检测。 本论文以转基因大豆及其加工产品作为实验材料，相应的包含了两个相关而又不同水平的两个部分。一部分是转基因大豆(Roundup-Ready soybean)及其加工产品的DNA水平的检测技术研究，另一部分是转基因大豆的蛋白水平检测技术研究。 在DNA水平上的研究，首先优化了转基因大豆及其加工产品豆粕、豆腐、豆奶和酱油的DNA抽提方法，得到了OD值在1.7-1.9之间的高质量的可用于PCR检测的DNA。随后，建立了基于聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)和能够在同一反应管中同时扩增两个片断的复合PCR反应基础上的检测方法，对转基因大豆的外源基因EPSPS(5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase，来源于A.tumefaciens菌株CP4)和内源基因Lectin(用于转基因大豆的鉴别)进行检测。根据EPSPS和Lectin特异的基因序列，利用Primer Premier 5.0设计了两对引物。使用这两对引物进行的PCR分析结果表明对转基因大豆的检测灵敏度可达0.01ng。复合PCR检测结果表明，本文设计的这两对引物可以成功的用于转基因大豆及其加工产品豆粕、豆腐、豆奶和酱油的检测。最后，利用Primer Premier 5.0和Beacon Designer 2.0软件设计了相应的引物和探针，建立了实时荧光定量PCR的Taqman技术反应体系，并绘出了用于大豆转基因成分定量检测的标准曲线。Taqman技术的PCR分析结果表明定量PCR检测的灵敏度可达0.01ng。 蛋白水平的检测方法主要包括Western印迹和ELISA(enzyme linked immunosorbent assays，ELISA)两种方法。为了制备可以用于酶免疫分析的多克隆抗体和单克隆抗体，构建了可以大量产生作为抗原的EPSPS重组蛋白的大肠杆菌表达载体p28aYTY。SDS电泳分析结果表明EPSPS重组蛋白的表达量在55%以上，纯化的EPSPS重组蛋白纯度可以达到90%。随后，利用纯化的EPSPS重组蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔获得了多克隆抗体。Western印迹分析结果表明制备的多克隆抗体可以成功的用于转基因大豆的外源基因编码蛋白的检测。 应用杂交瘤技术，建立了17株能稳定分泌抗EPSPS重组蛋白的单克隆抗体 (McAb)的杂交瘤细胞株。所有的杂交瘤细胞株接种至预先进行腹腔注射降植烷的Balb/c小鼠腹腔均育既急定的产生瘤性腹水，腹水用45%的硫酸按溶液进行初步纯化。随后将得到的单克隆抗体初步用于转基因大豆的双抗体夹心ELISA(DAS一ELISA)检测当中。 利用抗体技术进行的免疫分析是用于已知抗原检测的理想方法，单克隆抗体(通常具有更高的灵敏度)和多克隆抗体(通常具有更高的特异性)的应用应根据检测系统的数量和特异性以及检测时间、检测成本需要的需要合理选择。